核糖核酸酶H（RNaseH）-限制性內(nèi)切酶-分子生物學(xué)
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| 別名 | RNA酶H |
|---|---|
| 英文名稱 | Ribonuclease H |
| 儲(chǔ)存條件 | -20℃ |
■ RNase H內(nèi)容
Ribonuclease H (20～60 U/μl) 600 U
5×Hybrid RNA Degeneration Buffer 300 μl
■ RNase H說明
RNase H是特異性分解RNA-DNA雜交體中的RNA鏈的核糖核酸內(nèi)切酶，分子量為21,000，最適pH約為8.0。活性因子為Mg2+或Mn2+。
■ 保存
-20℃。
■ 起源
Escherichia coli HB101 containing rnh plasmid (pKH11) and regulator plasmid (pNT203) ■ 活性定義 以poly(rA)·poly(dT)為底物，在30℃、pH7.7的條件下，20分鐘內(nèi)產(chǎn)生1 nmol酸可溶性物質(zhì)所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位 (U)。
■ 純度
1.50 U的本酶和1 μg的λ DNA-Hind III分解物在37℃下反應(yīng)16小時(shí)，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。 2.50 U的本酶和1 μg的超螺旋pBR322 DNA 在37℃下反應(yīng)1小時(shí)，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。 3.50 U的本酶和1 μg的16S，23S rRNA在37℃下反應(yīng)1小時(shí)，RNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
■ 用途
1.通過Okayama-Berg法進(jìn)行cDNA Cloning。
2.DNA-RNA雜交體的檢定。
3.在Oligo (dT) 存在下除去mRNA的Poly (A) 末端。
■ 使用注意
本酶由大腸桿菌重組體精制而成，雜質(zhì)很少，是純度很高的制品。因此，即便是高濃度制品，大量使用也完全沒有問題。
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