HotStartTaqDNAPolymerase-核酸提取/純化-分子生物學
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| 別名 | 熱啟動酶 熱啟動DNA聚合酶 熱啟動Taq DNA聚合酶 |
|---|---|
| 儲存條件 | -20℃保存, 有效期至少一年 |
Hot Start Taq DNA Polymerase品是抗Taq單克隆抗體修飾的熱啟動Taq DNA Polymerase，高溫加熱前抗Taq單克隆抗體與 Taq酶結合，抑制聚合酶的活性，從而抑制低溫條件下由引物的非特異性退火或引物二聚體引起的非特異性擴增。抗Taq單克隆抗體在PCR反應最初的DNA變性步驟已變性，因此無需特殊失活處理，在常規PCR反應條件下即可使用。在qPCR反應中，能明顯提高熒光PCR的擴增效率（尤其對低拷貝數模板），改善其擴增曲線的完美度，其穩定性好、可重復性高、特異性強。此酶室溫放置一周，酶活性仍可保持95%以上。 活性定義：1單位(U) Taq DNA Polymerase活力定義為在74℃，30分鐘內，以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板，將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質所需的酶量。 質量控制： SDS-PAGE檢測Taq DNA Polymerase純度大于99%；經檢測無外源核酸酶活性；PCR方法檢測無宿主殘余DNA；能有效地擴增人類基因組中的單拷貝基因；室溫存放一周，無明顯活性改變。 酶貯存緩沖液： 20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; 50% glycerol; 穩定劑 適用范圍： 用于小于6kb的對保真度要求不高的DNA片段的PCR擴增、DNA標記、引物延伸、序列測定、平末端加A等，產物可以直接用于T/A載體克隆。 建議PCR條件：預變性溫度是95度，時間為5-10分鐘，其它的和普通Taq酶的反應條件一樣。
PCR體系（以50μl反應體系為例）
Template <0.5μg
上游引物（10μM） 1μl
下游引物（10μM） 1μl
10×Buffer（含Mg2+） 5μl
dNTP（各2.5mM） 4μl
熱啟動Taq酶 0.5-1μl
ddH2O up to 50μl
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