小鼠生殖工程學技術——3小鼠附睪尾部的低溫運輸
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回到小鼠生殖工程凍存及培養試劑
◆材料
1、成年的雄性小鼠2、解剖用的剪刀（夏目制造所 小直剪刀Cat.No.B-12）3、解剖用的鉗子（夏目制造所 尖鉗子Cat.No.A-5）4、自動施夾鉗（日本Becton, Dickinson and Company Cat.No.427630）5、自動縫合器（日本Becton, Dickinson and CompanyCat.No.427631）6、麻醉劑7、加熱盤8、紐扣式溫度記錄儀（KM Laboratories 溫度記錄儀 Thermochron G type）9、0.2ml Ep管(注入凍存液)10、CARD冷藏運輸試劑盒（1）棉花（2）紙盒（3）保溫瓶（4）制冷劑（小）（5）制冷劑（大）（6）泡沫箱※ 紐扣式溫度記錄儀，0.2mL EP管（裝入凍存液）和CARD 冷藏運輸試劑盒，預先放進4～8℃的冰柜里，使用時直接從冰柜里取出，并迅速進行實驗。
◆方法
單側附睪尾采集
術前，用酒精消毒全部解剖工具。1、麻醉一只12周齡以上的雄性小鼠，使其仰臥。2、用酒精棉消毒陰囊附近的位置（消毒后，如陰囊沒有脹大，可能是因為睪丸縮入腹腔，只要用手指輕按下腹部，睪丸就會移回陰囊內）。3、切開陰囊單側，露出附睪尾。
4、切斷輸精管與附睪體，取出附睪尾（即使不能完全去除尾部的血液與脂肪也不會影響運輸）
【采集的附睪尾和脂肪塊】
※附睪尾內部的細管（附睪管）構造盤旋曲折，注意仔細觀察，不要與其他內臟混淆。
要點：取出附睪尾時，為了不傷尾部，可按壓著脂肪一起取出。 睪丸移回體內時，為不傷睪丸，請按壓著切開的肌層一起移回。
5、用自動縫合器，縫合切開的皮層（也可用縫合線）
※如要采集兩個附睪尾時，也按照3~5步驟進行。6、讓小鼠仰臥在加熱盤上，從麻醉到蘇醒期間，保持小鼠的溫度。
※取出單側附睪尾的小鼠，在術后1周內可以與其他小鼠進行交配。
冷藏運輸附睪尾
1、從冰柜里取出0.2mL EP管（裝有凍存液），讓附睪尾沉入凍存液里，用封口膜纏繞0.2mL EP管的蓋子。
2、在紙盒內放入0.2mL EP管和紐扣式溫度記錄儀，用棉花覆蓋后蓋上蓋子。
3、紙盒放進保溫瓶內。
4、在保溫瓶內放進兩個制冷劑（小）。
5、蓋上保溫瓶蓋。
6、確認蓋子蓋緊后，在泡沫箱里鋪上制冷劑（大），把保溫瓶放進里面（這時，注意不要顛倒保溫瓶內的0.2mL EP管）。接著，在保溫瓶的兩側及上方，都放上制冷劑（大），蓋上泡沫箱蓋子后，用包裝膠帶牢牢捆扎。7、用快遞運輸前，把整個泡沫箱放進冰柜內保存。8、快遞（冷藏）運輸（最長可保存72個小時）
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