品牌: biomics
公司: 百奧邁科生物技術(shù)有限公司
貨號： BK2100 保存條件： 避光保存于-20℃ 供應(yīng)商： Biomics Biotech 數(shù)量： 大量 英文名： EzOmicsTM One-Step qPCR Kit 保質(zhì)期： 6個月以上 規(guī)格： 100T/200T/500T
規(guī)格： | 100T
產(chǎn)品價格： | ￥2000.0
規(guī)格： | 200T
產(chǎn)品價格： | ￥3800.0
規(guī)格： | 500T
產(chǎn)品價格： | ￥9000.0 產(chǎn)品詳情請聯(lián)系金山科研平臺微信：jinshanbio
試用產(chǎn)品：一步法實時熒光定量PCR檢測試劑盒（5次量）申領(lǐng)時間：2014.06.03-2014.06.22試用細則：1、活動針對學校、醫(yī)院、科研院終端客戶所在實驗室，每個實驗室只能申請一份試用裝2、參加過往期試用活動的客戶無法參加本次活動3、江浙滬地區(qū)優(yōu)先4、本次活動郵費均有我公司承擔5、申請結(jié)束后，我們會統(tǒng)一審核申請信息，并與審核通過者電話聯(lián)系確認6、收到試用裝后1個月內(nèi)提交優(yōu)秀試用報告者，可申請8折購買本產(chǎn)品7、最終解釋權(quán)歸Biomics所有備注：1、試用報告模板可通過【該頁面最下方】或【管理中心-試用中心】下載（填寫之后發(fā)至toni@biomics.cn）2、若您是要檢測microRNA，需要準備microRNA特異引物，可配套我們的【miRNA特異引物試劑盒】使用3、掃描公司二維碼或搜索【Biomics-RNAi】，關(guān)注百奧邁科微信平臺，也可有機會獲得一步法實時熒光定量PCR檢測試劑盒試用裝（5次量）
可掃描二維碼：加微信咨詢。
EzOmicsTM 一步法實時熒光定量PCR 檢測試劑盒
貨號：BK2100產(chǎn)品包裝： 保存于-20℃
EzOmicsTM 一步法qPCR檢測試劑盒有100，200，500和2000次(50μl/反應(yīng)) 四種不同規(guī)格的包裝。
試劑包裝規(guī)格描述100次反應(yīng)200次反應(yīng)500次反應(yīng)2000次反應(yīng)2×Master Mix1.25ml×21.25ml×41.25ml×101.25ml×402×mix包含反應(yīng)緩沖液，SYBR Green I，反轉(zhuǎn)錄酶，熱啟動DNA聚合酶，RNase抑制劑，dNTPs，6mM MgCI2， 穩(wěn)定劑等等。DEPC-H2O1.5ml×11.5ml×21.5ml×51.5ml×20DEPC處理無菌水，不含DNase和RNase。
產(chǎn)品說明：
EzOmicsTM 一步法實時定量PCR檢測試劑盒，采用一步反應(yīng)法完成整個RT-qPCR過程，將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，cDNA模板qPCR定量放在同一反應(yīng)體系中進行，反應(yīng)過程無需增加額外的步驟。本試劑盒具有方便、簡捷、靈敏度高、重復(fù)性好的特點，即適用于SYBR Green I熒光染料法，同時也適用于熒光探針的檢測方法。此試劑盒適合市面上大多數(shù)現(xiàn)有的Real-time PCR儀器.反應(yīng)條件及使用建議
反應(yīng)混合體系配制建議：?一般建議至少配制比樣本多一個反應(yīng)體系的混合體系(例如：如需要8個樣本，配制9個混合體系)。
建議添加無模板對照(Non-Template control，NTC) ，即添加DEPC-H2O 取代模板。
反轉(zhuǎn)錄
cDNA合成所需溫度，可以在37℃～45℃進行設(shè)置，根據(jù)模板和反轉(zhuǎn)錄引物，選擇特異性好，效率高的溫度。
熱啟動DNA聚合酶
EzOmicsTM 一步法qPCR檢測試劑盒中使用的是熱啟動Taq DNA聚合酶，在常溫條件下，酶的活性受到抑制。只有通過95°C反應(yīng)10 min，激活熱啟動酶的活性，參與下一步qPCR反應(yīng)。
MgCl2 濃度優(yōu)化
MgCl2 是DNA聚合酶的一個復(fù)合因素。終濃度為3mM的MgCl2 濃度適用于大部分反應(yīng)。然而，MgCl2的需求往往不盡相同，這取決于特殊的模板和引物。尤其是使用SYBR Green I熒光探針時，往往需要更高濃度的MgCl2。建議針對合適的模板，設(shè)計3個重復(fù)反應(yīng)，按下表格給的MgCl2濃度梯度。下表為50μl體系中MgCl2達到各終濃度時的需要加入的量。
根據(jù)實驗結(jié)果，分析擴增效率、熔解曲線等，選擇最佳的MgCl2 濃度用于之后的相關(guān)qPCR的實驗。引物設(shè)計和濃度
大多數(shù)情況下，引物終濃度為200nM是能夠滿足PCR反應(yīng)。不過，根據(jù)特殊的模板和引物，引物終濃度可以在25 ~ 900 nM范圍內(nèi)進行優(yōu)化。引物設(shè)計可借助于實時熒光定量PCR引物（探針）設(shè)計軟件（如：Beacon Designer）。為獲得最佳定量結(jié)果，產(chǎn)物大小最好控制在80 ~ 200bp的范圍內(nèi)。
模板濃度
過量的模板會抑制反應(yīng)的進行。通常情況下，每50μl反應(yīng)體系中，總RNA含量在10ng～200ng是足夠的。當然特殊的基因會有所不同。
探針濃度
多數(shù)情況下，引物和探針的摩爾比控制在3:1比較合適。根據(jù)實際情況，探針的濃度可在10 ~ 250 nM范圍內(nèi)進行優(yōu)化。
熔解曲線分析
如果使用SYBR Green I染料法，建議在qPCR反應(yīng)結(jié)束后進行熔解曲線分析，若儀器含有此功能。請參照儀器制造商推薦的使用方法說明。不含模板的陰性對照（NTC）用來確定反應(yīng)過程中是否存在引物二聚體，含有模板的反應(yīng)體系確定產(chǎn)物是否單一。注：可以跑瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產(chǎn)物的特異性。實驗方法
SYBR Green I 染料法
熒光探針法
保存和穩(wěn)定性試劑盒避光保存于-20°C。避免反復(fù)凍融。此儲存條件下，試劑可保存6個月以上。以下是我公司推出的microRNA檢測、實驗實驗優(yōu)惠套餐1、microRNA 檢測實用優(yōu)惠套餐：貨號BZ005 價格2650元
貨號產(chǎn)品名稱相關(guān)說明BK1010miRNA 特異引物試劑盒200T（贈送內(nèi)參引物）高特異性，特殊設(shè)計BK2100miRNA熒光定量PCR檢測試劑盒100T進口分裝
2、microRNA實驗實用優(yōu)惠套餐：優(yōu)惠套餐一：貨號BZ001價格3298元
貨號產(chǎn)品名稱相關(guān)說明MIR001miRNA 化學合成（mimics，inhibitor，NC） 5nmol客戶提供miRNA名稱11668轉(zhuǎn)染試劑lipfection2000 100ulinvitrogenBK1010miRNA 特異引物試劑盒 200T根據(jù)客戶提供名稱BK2100miRNA熒光定量PCR檢測試劑盒100T進口分裝
優(yōu)惠套餐二：BZ002 價格4898
貨號產(chǎn)品名稱相關(guān)說明MIR002miRNA 載體構(gòu)建客戶提供miRNA名稱，免費提供載體11668轉(zhuǎn)染試劑lipfection2000 100ulinvitrogenBK1010miRNA 特異引物試劑盒 200T客戶提供名稱（贈送內(nèi)參引物）BK2100miRNA熒光定量PCR檢測試劑盒100T進口分裝
溫馨提示：不可用于臨床治療。
資料下載：
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EzOmicsTM+miRNA+qPCR+Detection+Primer+Set（BK1010）.pdf 附件下載 (下載 30 次)
BK2100 EzOmics 一步法 qPCR 試劑盒-中文.pdf 附件下載 (下載 45 次)
qPCR檢測試劑盒試用報告模板.doc 附件下載 (下載 20 次)
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