品牌: biomics
公司: 百奧邁科生物技術有限公司
提供商: Biomics Biotech 服務名稱: microRNA質粒/載體構建(過表達載體構建,靶基因報告載體/ 熒光素酶報告載體構建 )
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miRNA 過表達質粒構建
miRNA過表達載體是根據客戶需要,將完整的Pre-miRNA表達框克隆于II型或III型啟動子的下游,通過轉染的方式將載體導入培養細胞,轉錄出Pre-miRNA進而加工成成熟的miRNA,模擬內源性miRNA發揮調控效應和功能。
1、服務流程:a) 提供您所需要構建miRNA名稱,miRbase登錄號或者序列,由我公司專業技術人員進行實驗設計并給出報價;b) 簽訂miRNA質粒載體構建合成合同,支付預付款;c) 設計合成引物, PCR反應擴增及PCR產物酶切;d) 將酶切產物純化,克隆至miRNA表達質粒載體系統;e) 最后通過DNA測序,確認插入片段的準確性;f) miRNA表達載體合成結束,發貨并向客戶提供實驗報告。
2 、提供結果a)質粒;b) 測序圖譜/序列;c) miRNA載體構建報告書。
miRNA抑制劑(Anti-miRNA)表達載體根據客戶需要,將含有一個或多個miRNA結合位點的序列克隆于II型或III型啟動子的下游,通過轉染的方式將載體導入培養細胞,轉錄出含miRNA結合位點的RNA序列,可特異、高效地抑制生物體內源性miRNA的活性,以進行功能缺失性研究,是研究miRNA功能的必要工具。
1服務流程:a) 提供您所需要構建miRNA名稱,miRbase登錄號或者序列,由我公司專業技術人員進行實驗設計并給出報價;b) 簽訂miRNA抑制表達質粒載體構建合成合同,支付預付款;c) 設計合成引物, PCR反應擴增及PCR產物酶切;d) 將酶切產物純化,克隆至miRNA抑制表達質粒載體系統;e) 最后通過DNA測序,確認插入片段的準確性;f) miRNA抑制表達質粒合成結束,發貨并向客戶提供實驗報告。
2提供結果a)質粒;b) 測序圖譜/序列;c) miRNA抑制表達質粒載體構建報告書。
miRNA 熒光素酶質粒構建Biomics構建您所要研究的miRNA靶基因3’UTR區域,您只需將miRNA mimics與構建好的靶基因載體共轉,即可檢測miRNA是否對靶基因有調控作用。當您需要篩選與疾病相關的miRNA時,只須將疾病基因的3’UTR報告載體與miRNA文庫共轉,即可獲得大量可靠的miRNA調控信息,高效,準確。
1服務流程:
a) 提供您所需要構建的基因名,GeneBank登錄號或者基因3’UTR序列信息,由我公司專業技術人員根據序列具體情況設計實驗方案并給出報價;
b) 簽訂3’UTR質粒載體構建合同,支付預付款;
c) 設計合成3‘UTR克隆引物,PCR反應擴增及PCR產物酶切;
d) 將PCR酶切產物純化,克隆至報告基因檢測系統;
e) 最后通過DNA測序,確認插入片段的準確性,完成實驗;
f ) 載體構建完成后,發貨并向客戶提供實驗報告。
2提供結果
a) 裝載靶基因3’UTR的質粒;
b) 測序圖譜/序列;
c) 載體構建報告書。
3備注
客戶需準備熒光照度計及雙熒光素酶檢測試劑盒。miRNA靶位點預測工具
miRNA的研究意義之重大是毋庸置疑的。然而,與新的miRNA的頻頻發現相比,miRNA的功能研究相對緩慢。到目前為止,在發現的4449多個miRNA中,確定功能的miRNA僅有幾十個。導致miRNA功能研究進展緩慢的非常重要的原因是miRNA的作用靶標難以確定。事實上,通過實驗方法確定miRNA的作用靶標非常耗時,目前尚無高通量的靶標鑒定方法。因此,通過理論方法預測miRNA的作用靶標成為當前識別miRNA作用靶標的較為理想的途徑。以下重點介紹幾種經典預測軟件的算法分析,其他軟件(見下表)請查看相應網站。
靶序列預測工具適用物種鏈接EMBL果蠅http://www.russell.embl-heidelberg.de/miRNAsmiRanda果蠅,脊椎動物http://microrna.org/miranda.htmlPicTar脊椎動物,果蠅http://pictar.bio.nyu.eduTargetScan脊椎動物http://genes.mit.edu/targetscanRNA hybrid果蠅http://www.techfak.uni-bielefeld.de/persons/marc/mirna/targetsViTa病毒http://vita.mbc.nctu.edu.tvmiTargert動物http://cbit.snu.ac.kr/~miTargetMiRTif動物http://mirtif.bii.a-star.edu.sgmiRacle動物http://miracle.igib.res.in/miraclemicroTar動物http://tiger.dbs.nus.edu.sg/microTarEIMMo人,果蠅,線蟲,斑馬魚http://www.mirz.unibas.ch/ElMMomiRU植物http://bioinfo3.noble.org/miRNA/miRU.htmlDIANA-MicroT人,鼠images/service/trtrtd width="113">RNA22動物http://cbcsrv.watson.ibm.com/rna22.htmlMicroInspector動植物、病毒http://mirna.imbb.forth.gr/microinspectorTarBase實驗驗證miRNA靶基因http://www.diana.pcbi.upenn.edu/tarbase.html
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