RNAwait(非凍型組織RNA保存液)-核酸提取/純化-分子生物學
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| 別名 | 非凍型組織RNA保存液 |
|---|---|
| 英文名稱 | RNAwait RNAlater |
| 儲存條件 | 室溫保存，有效期兩年。 |
| 外觀（性狀） | 液體 |
| 單位 | 瓶 |
產品說明：
RNAwait是一種無毒的可直接使用的樣品儲存液，能使細胞內的RNA與RNA酶分離，可以快速可靠地保存動物組織、細胞內的RNA。組織獲取后立即浸入RNAwait保存液中，在室溫可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃標本可以長期保存，RNA穩定存在不降解，取出后用各類方法抽提可以獲得高質量的RNA。
操作流程：
1. 根據要保存的各樣本的體積，計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應當是組織體積的10倍（如100mg組織約用1ml RNAwait）；離心收集2×106細胞RNAwait的用量是1ml。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中；
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀，立即完全浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入，組織中間部位的RNA不能受到保護。較小的組織（如大鼠的腎臟、脾臟，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存時先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過夜（4℃過夜是必需的，這樣可使RNAwait完全滲入到組織中），然后轉移到-20℃冰箱；或者在4℃冰箱過夜后，從RNAwait中取出組織塊，轉移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的標本，反復凍融至室溫20次不影響RNA的質量。
注意事項：
1. 組織和細胞取材速度要快，在獲取后應當盡快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰凍組織不能用RNAwait保存，因為RNAwait不能有效滲入冰凍組織。
3. 保存樣品的RNA提取：樣本從-20℃或-80℃冰箱取出后，復蘇到室溫后，取出組織塊，再用于提取RNA。細胞樣本則復溫后低速離心收集細胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后繼的處理（如組織勻漿）可以在室溫下進行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保護。殘留少量RNAwait保存液不影響后繼提取RNA的質量。
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