天恩澤 熒光及可視化LAMP試劑盒 200601-50,產品簡介:產品品牌:天恩澤產品名稱:熒光及可視化LAMP試劑盒產品規格:50次產品貨號:200601-50運輸:低溫保存:-20℃
天恩澤 熒光及可視化LAMP試劑盒 200601-50
我們上海金山科研平臺公司作為天恩澤公司的代理商,先簡單介紹一下天恩澤公司:
北京天恩澤公司的目標是研發出技術先進、質量穩定、價格合理的試劑精品。公司的創立宗旨是技術至上、質量至上、服務至上,公司的產品研發團隊均為高學歷并在海外有長期的科研經驗;公司的管理團隊已在行業內擁有超過20年管理經驗;同樣,公司的運營團隊也有豐富的執行經驗。
北京天恩澤公司充分了解客戶的需求,并努力創新以滿足客戶不斷發展的需求。我們將與我們的客戶共同成長,成為生物技術領域中zhuoyue產品和服務的jijia提供者。
DNAout、RNAout、Erasol、天凈沙、克必隆、歸去來、好亦多均為天恩澤基因注冊商標(試劑類)。
天恩澤 熒光及可視化LAMP試劑盒 200601-50,產品簡介:
產品品牌:天恩澤
產品名稱:熒光及可視化LAMP試劑盒
產品規格:50次
產品貨號:200601-50
產品價格:1390元
運輸:低溫
保存:-20℃
有效期:1年
貨期:1-3天
天恩澤 熒光及可視化LAMP試劑盒 200601-50,產品說明:
本產品是根據本公司的雙染料LAMP技術開發的熒光和可見光雙模式 LAMP擴增及檢測試劑盒,它既可以用于熒光LAMP 擴增及檢測,也可以用于 可視化LAMP 擴增及檢測,適用于各種針對核酸的快速定性檢測。本產品具有 下列特點:
1. 一般60分鐘內出結果(取決于靶分子濃度),比PCR快約1小時。
2. 對20 μL的反應體系,可以樣品加樣量達到14 μL。
3. 含可見光和熒光染料,既可以用金屬浴和水浴擴增用可見光肉眼判斷結果, 也可用熒光PCR儀進行實時熒光檢測。
4. 內含的dUTP-UNG可防交叉污染。
5. 特異性比PCR高,因為LAMP 擴增使用4-6條引物而不是兩條。
6. 靈敏性可達10拷貝/反應以下(隨引物而不同),故假陰性率更低。
7. 本產品跟北京天恩澤的多種免提取試劑盒(如免提病毒保存液)兼容。
8. 只可用于科研,只可進行定性檢測,不能用于定量檢測。
9. 本產品只適用于LAMP 檢測,不適用于進行RT-LAMP檢測。
10. 本產品足夠50次20 μL體系的熒光及可視化LAMP 擴增。
天恩澤 熒光及可視化LAMP試劑盒 200601-50,產品規格:
成分
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編號
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5孔塑料盒包裝
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4×熒光及可視化LAMP MagicMix
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200601a
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250 μL(綠蓋)
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4×陽性對照模板-引物混合物
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130923a
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50 μL(黃蓋)
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使用手冊
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200601sc
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1份
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運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。
使用方法:
自備試劑 :LAMP模板及LAMP引物、PCR級石蠟油(僅對使用金屬浴或水浴者)。
準備工作:如果使用水浴鍋或金屬浴,需要在實驗啟動前打開并調到65℃。如 果用金屬浴,還必須在孔中加水以填充金屬孔和反應管間的空隙。本公司發現 很多水浴鍋或金屬浴溫度不準,故建議先用陽性對照和陰性對照測試所用儀器 在60℃、62.5℃、65℃、67.5℃和70℃五個溫度下擴增效果,選擇陽性和陰 性顏色差異ji大的溫度進行擴增。
一、樣品DNA的制備 1. 用自選方法純化樣品DNA,本試劑盒跟市場上大多數DNA提取試劑盒兼 容,可以選購本公司的各種免提取試劑盒。 2. 如果有 N 個樣品,則至少需要做 N+2 個樣品制備,包括一個制備陽性對 照(制備時加入自備的跟要檢測的靶分子相同的陽性對照模板,一起經歷提取過程)和一個制備陰性對照(用水替代樣品)。ran后N+2個樣品一起 進行DNA提取操作,得到N+2個DNA樣品。
二、配制并測試自備的20×LAMP引物混合液 3. 用超純水將自備的6種(或4種)LAMP 引物干粉稀釋到母液濃度(100 μM),然后按下表配制100μL的20×LAMP 引物混合液,此混合液足夠 100次20 μL體系的LAMP擴增。如果需要配制的20×LAMP 引物混合 液體積異于 100 μL,則各成分的用量請按比例調整。引物混合液可以在 -20℃放置2年。
引物名稱
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母液濃度
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加母液量
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在20×LAMP引 物混合液中的濃度
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FIP引物
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100 μM
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32 μL
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32 μM
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BIP引物
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100 μM
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32 μL
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32 μM
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F3引物
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100 μM
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4 μL
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4 μM
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B3引物
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100 μM
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4 μL
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4 μM
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Loop F
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100 μM
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8 μL
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8 μM
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Loop B
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100 μM
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8 μL
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8 μM
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超純水
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12 μL
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注意:總體積為100 μL。如果自備的LAMP引物不含Loop引物,則按上 表配制時Loop用超純水替代,使得總體積為100 μL。 4. 測試引物的非特異擴增:在加模板和不加模板(至少1000拷貝/反應)的 LAMP 系統中測試引物效果,引物選擇標準可以自己掌握,可以選擇無模 板反應的Ct值比有模板反應的Ct值大60以上(每個循環1 分鐘)的引 物對。根據結果設定判斷陰性和陽性結果的閾值(本產品只用于定性)。 如果沒有 qPCR儀器,只能用肉眼檢測,則無需設定閾值,屆時靠跟陽性 對照和陰性對照管的顏色來判斷。
LAMP擴增(20 μL體系)
反應設置:如果有 N+2 個 DNA 純化樣品,則可以設置 N+5 個LAMP 擴 增,增加擴增陽性對照、無模板對照和無引物對照各1個。在 N+5個0.2mL 的PCR管中加入下列成分:
成分
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N+2個 樣品管
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無模板 對照管
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無引物 對照管
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擴增陽性 對照管
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4×熒光及可視化 LAMP MagicMix
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各5 μL
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5 μL
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5 μL
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5 μL
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自備20×引物混合液
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各1 μL
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1 μL
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–
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自備N+2 個 樣品DNA
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較多14 μL
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同樣品管
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–
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4×陽性對照 模板-引物混合物
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–
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–
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5 μL
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超純水
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補到20μL
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補到20μL
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14 μL
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10 μL
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6. 混勻后進行擴增,可以根據實驗室條件選擇下列兩種方式進行擴增和檢測。
7. 如使用金屬浴、水浴或普通無熱蓋 PCR 儀,則每管加 30μL 石蠟油,再 65℃保溫120分鐘。如不加石蠟油,保溫期間水分蒸發,會有非特異擴增。
8. 如果使用熒光定量 PCR 儀:聚合溫度設為 65℃,1 次循環 1 分鐘,120 個循環,每分鐘在FAM通道采集一次熒光信號。 三、結果分析及解讀 9. 閾值設定:在*分鐘熒光值會升高再穩定,故只能取第10到15分鐘 的熒光值作閾值。此現象估計是常溫下可見光染料和熒光染料結合并對后 者有淬滅作用,加熱到65℃后兩種染料分開,淬滅逐漸解除,熒光逐漸升 高,10分鐘后穩定。沒加可見光染料的反應無此現象。 10. 所有陽性對照有陽性結果(Ct 在60以內或反應液呈藍色),所有陰性對 照有陰性結果(Ct 大于60 或反應液呈淡藍色),否則提取實驗或擴增實 驗無效。需要尋找原因或跟廠家聯系,暫時不需要分析樣品的結果。 11. 如果陽性和陰性對照結果正常,則實驗有效,可以分析樣品的情況。如果 肉眼觀察,樣品管的顏色接近擴增陽性對照管則說明有擴增有靶分子,如 果接近無模板和無引物的陰性對照,則說明無擴增無靶分子。反應結果示 例如下(9為陰性,10為陽性)
12. 如果是用熒光PCR儀,樣品Ct將小于閾值則為陽性,大于閾值則為陰性。
13. 當實時熒光檢測和可視化檢測同時使用時,如果不一致,以實時熒光LAMP 的數據為準。一般可視化結果滯后實時熒光檢測結果20-30分鐘,也就是 說,在 qPCR 儀上第 30 分鐘時呈現陽性的樣品,其顏色變化在第 50-60 分鐘時才能觀察到。
關聯產品:免核酸純化病毒保存液,PCR級石蠟油
以下是天恩澤品牌部分熱銷產品,如需其他品牌產品請咨詢本店客服:
品牌
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產品貨號
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貨品名稱
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規格
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天恩澤
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200101-50
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第二代病毒采運試劑盒(低敏型)原拭子病毒采運試劑盒,核酸診斷用
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50次/盒
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天恩澤
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200201-50
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第三代免提核酸提取病毒采運試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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200601-50
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熒光及可視化LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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200603-50
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熒光及可視化RT-LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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200108-2.5L
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xinguan病毒滅活液A型
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2.5L/瓶
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天恩澤
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91103-250
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非凍型拭子病毒保存液
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250ml/瓶
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天恩澤
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15-81920
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SARS-CoV-2冠狀病毒N基因探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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16-81920
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SARS-CoV-2冠狀病毒N基因熒光及可視化RT-LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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15-23000
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African Swine Fever Virus(ASFV)非洲豬瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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16-23000
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African Swine Fever Virus(ASFV)非洲豬瘟病毒LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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15-29420
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Yersinia pestis鼠疫耶爾森菌(鼠疫桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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71201-50
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柱式動物RNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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71001-50
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柱式病毒RNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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60705-50
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一管式植物DNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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3070-100
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動物RNA提取試劑盒(TRIzol)
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100mL/瓶
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天恩澤
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81027-50
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TRIzol伴侶
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50次/套
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天恩澤
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70701-50
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柱式病毒DNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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3674-50
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一管式病毒DNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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90404-50
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柱式植物RNA提取試劑盒2.0
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50次/套
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天恩澤
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60802-50
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柱式細菌DNA提取試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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71203-50
|
柱式植物RNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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60602-50
|
柱式植物DNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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90315-250
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非凍型尿液DNA保存液
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250mL/瓶
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天恩澤
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3660-250
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非凍型組織DNA保存液
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250mL/瓶
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天恩澤
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3060-250
|
非凍型組織RNA保存液
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250m/瓶
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天恩澤
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90805-10
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即用型PCR試劑盒3.0
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1ml×10/盒
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天恩澤
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90708-1.5
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即用型高保真PCR試劑盒
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1.5mL/瓶
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天恩澤
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90408-1
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2X 染料法熒光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix)
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1ml/管
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天恩澤
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190303-1
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2X 探針法qPCR Mix (TaqMan探針法熒光定量PCR試劑盒)
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1ml/管
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天恩澤
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101005-100
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即用型易錯PCR試劑盒
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100次/套
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天恩澤
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160903-100
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可調式易錯PCR試劑盒
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100次/套
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天恩澤
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3090-250
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天凈沙RNase清除劑A型(原固相RNase清除劑)
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250mL/瓶
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天恩澤
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3091-1.5
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天凈沙RNase清除劑B型(原液相RNase清除劑)
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1.5mL/套
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天恩澤
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140648-250
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PCR污染清除劑
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250 mL/瓶
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天恩澤
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70902-1.5
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PCR級甜菜堿溶液,5M
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1.5mL/管
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天恩澤
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100805B-250
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Tris飽和酚-lvfang-yiwuchun混合液(DNA提取用)
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250ml/瓶
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天恩澤
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130502-50
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無內毒素水
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50mL/瓶
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天恩澤
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160251-250
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4%中性甲醛固定液
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250mL/瓶
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天恩澤
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100302-100
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包涵體蛋白溶解及復性套裝
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100次/次
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天恩澤
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200604
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核酸釋放劑(DNA-RNA通用型)
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300次/盒
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天恩澤
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61202-10
|
天凈沙核酸釋放劑
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10mL/瓶
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天恩澤
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70303-1.5
|
綠如藍核酸染料(UV)
|
1.5mL/管
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天恩澤
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70503
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DNA電泳分子量標準系列
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50次/管
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天恩澤
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小師弟
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高壓快速電泳預制膠
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10塊/盒
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