天恩澤 熒光及可視化RT-LAMP擴增試劑盒 200603-50，產(chǎn)品簡介：產(chǎn)品品牌：天恩澤產(chǎn)品名稱; 熒光及可視化RT-LAMP擴增試劑盒產(chǎn)品貨號：200603-50產(chǎn)品規(guī)格：50次產(chǎn)品價格：1590元
天恩澤 熒光及可視化RT-LAMP擴增試劑盒 200603-50
我們上海金山科研平臺公司作為天恩澤公司的代理商，先簡單介紹一下天恩澤公司：
北京天恩澤公司的目標是研發(fā)出技術(shù)先進、質(zhì)量穩(wěn)定、價格合理的試劑精品。公司的創(chuàng)立宗旨是技術(shù)至上、質(zhì)量至上、服務至上，公司的產(chǎn)品研發(fā)團隊均為高學歷并在海外有長期的科研經(jīng)驗；公司的管理團隊已在行業(yè)內(nèi)擁有超過20年管理經(jīng)驗；同樣，公司的運營團隊也有豐富的執(zhí)行經(jīng)驗。
北京天恩澤公司充分了解客戶的需求，并努力創(chuàng)新以滿足客戶不斷發(fā)展的需求。我們將與我們的客戶共同成長，成為生物技術(shù)領(lǐng)域中zhuoyue產(chǎn)品和服務的jijia提供者。
DNAout、RNAout、Erasol、天凈沙、克必隆、歸去來、好亦多均為天恩澤基因注冊商標(試劑類)。
天恩澤 熒光及可視化RT-LAMP擴增試劑盒 200603-50，產(chǎn)品簡介：
產(chǎn)品品牌：天恩澤
產(chǎn)品名稱; 熒光及可視化RT-LAMP擴增試劑盒
產(chǎn)品貨號：200603-50
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品價格：1590元
天恩澤 熒光及可視化RT-LAMP擴增試劑盒 200603-50，產(chǎn)品說明：
本產(chǎn)品是根據(jù)本公司的雙染料 RT-LAMPzhuanli技術(shù)開發(fā)的熒光和可見光雙 模式RT-LAMP擴增及檢測試劑盒，它既可以用于熒光RT-LAMP擴增及檢測， 也可以用于可視化 RT-LAMP 擴增及檢測，適用于各種針對核酸的快速定性檢 測。本產(chǎn)品具有下列特點：
一般60分鐘內(nèi)出結(jié)果（取決于靶分子濃度），比RT-PCR快約1小時
20 μL的反應體系，大樣品加樣量達到14 μL。
3. 含可見光和熒光染料，既可以用金屬浴和水浴擴增用可見光肉眼判斷結(jié)果， 也可用熒光PCR儀進行實時熒光檢測。
4. 內(nèi)含的dUTP-UNG可防交叉污染。
5. 特異性比RT-PCR高，因為RT-LAMP 擴增使用4-6條引物而不是兩條。6. 靈敏性可達10拷貝/反應以下（隨引物而不同），故假陰性率更低。
7. 本產(chǎn)品跟北京天恩澤的多種免提取試劑盒（如免提病毒保存液）兼容。
8. 只可用于科研，只可進行定性檢測，不能用于定量檢測。
9. 本產(chǎn)品只適用于RT-LAMP 檢測，不適用于進行RT-LAMP檢測。
10. 本產(chǎn)品足夠50次20 μL體系的熒光及可視化RT-LAMP 擴增。
天恩澤 熒光及可視化RT-LAMP擴增試劑盒 200603-50，產(chǎn)品規(guī)格及成分：
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成分
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編號
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5孔塑料盒包裝
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4×熒光及可視化RT-LAMP MagicMix
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200603a
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250 μL（綠蓋）
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4×陽性對照模板-引物混合物
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130923a
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50 μL（黃蓋）
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使用手冊
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200603sc
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1份
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運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。
自備試劑 RT-LAMP模板及RT-LAMP 引物、PCR級石蠟油 （僅對使用金屬浴或水浴者） 。
天恩澤 熒光及可視化RT-LAMP擴增試劑盒 200603-50，使用方法：
準備工作：如果使用水浴鍋或金屬浴，需要在實驗啟動前打開并調(diào)到65℃。如 果用金屬浴，還必須在孔中加水以填充金屬孔和反應管間的空隙。本公司發(fā)現(xiàn) 很多水浴鍋或金屬浴溫度不準，故建議先用陽性對照和陰性對照測試所用儀器 在60℃、62.5℃、65℃、67.5℃和70℃五個溫度下擴增效果，選擇陽性和陰 性顏色差異大的溫度進行擴增
一、樣品RNA的制備
1. 用自選方法純化樣品 RNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù) RNA 提取試劑盒兼 容，可以選購本公司的各種免提取試劑盒。
2. 如果有 N 個樣品，則至少需要做 N+2 個樣品制備，包括一個制備陽性對 照（制備時加入自備的跟要檢測的靶分子相同的陽性對照模板，一起經(jīng)歷提取過程）和一個制備陰性對照（用水替代樣品）。后N+2個樣品一起 進行RNA 提取操作，得到N+2個RNA 樣品。 二、配制并測試自備的20×RT-LAMP引物混合液
3. 用超純水將自備的6種（或4種）RT-LAMP引物干粉稀釋到母液濃度（100 μM），然后按下表配制100μL的20×RT-LAMP引物混合液，此混合液 足夠 100 次 20 μL 體系的 RT-LAMP 擴增。如果需要配制的 20× RT-LAMP引物混合液體積異于100 μL，則各成分的用量請按比例調(diào)整。 引物混合液可以在-20℃放置2年。
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引物名稱
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母液濃度
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加母液量
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在20×RT-LAMP 引物混合液中的濃度
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FIP引物
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100 μM
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32 μL
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32 μM
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BIP引物
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100 μM
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32 μL
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32 μM
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F3引物
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100 μM
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4 μL
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4 μM
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B3引物
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100 μM
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4 μL
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4 μM
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Loop F
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100 μM
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8 μL
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8 μM
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Loop B
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100 μM
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8 μL
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8 μM
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超純水
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12 μL
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注意：總體積為100 μL。如果自備的RT-LAMP引物不含Loop引物，則按 上表配制時Loop用超純水替代，使得總體積為100 μL。
4. 測試引物的非特異擴增：在加模板和不加模板（至少1000拷貝/反應）的 RT-LAMP 系統(tǒng)中測試引物效果，引物選擇標準可以自己掌握，keyi選擇 無模板反應的Ct值比有模板反應的Ct值大60以上（每個循環(huán)1 分鐘） 的引物對。根據(jù)結(jié)果設定判斷陰性和陽性結(jié)果的閾值（本產(chǎn)品只用于定性）。 如果沒有 qPCR儀器，只能用肉眼檢測，則無需設定閾值，屆時靠跟陽性 對照和陰性對照管的顏色來判斷。
三、RT-LAMP擴增（20 μL體系）
5. 反應設置：如果有N+2個RNA純化樣品，則keyi設置N+5個RT-LAMP 擴增，增加擴增陽性對照、無模板對照和無引物對照各 1 個。在 N+5 個 0.2mL的PCR管中加入下列成分：
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成分
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N+2個 樣品管
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無模板 對照管
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無引物 對照管
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擴增陽性 對照管
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4×熒光及可視化 RT-LAMP MagicMix
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各5 μL
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5 μL
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5 μL
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5 μL
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自備20×引物混合液
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各1 μL
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1 μL
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–
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自備N+2 個 樣品RNA
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多14 μL
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同樣品管
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–
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4×陽性對照 模板-引物混合物
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–
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–
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5 μL
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超純水
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補到20μL
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補到20μL
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14 μL
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10 μL
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6. 混勻后進行擴增，可以根據(jù)實驗室條件選擇下列兩種方式進行擴增和檢測。
7. 如使用金屬浴、水浴或普通無熱蓋 PCR 儀，則每管加 30μL 石蠟油，再 65℃保溫120分鐘。如不加石蠟油，保溫期間水分蒸發(fā)，會有非特異擴增。
8. 如果使用熒光定量 PCR 儀：聚合溫度設為 65℃，1 次循環(huán) 1 分鐘，120 個循環(huán)，每分鐘在FAM通道采集一次熒光信號。
三、結(jié)果分析及解讀
9. 閾值設定：在*分鐘熒光值會升高再穩(wěn)定，故只能取第10到15分鐘 的熒光值作閾值。此現(xiàn)象估計是常溫下可見光染料和熒光染料結(jié)合并對后 者有淬滅作用，加熱到65℃后兩種染料分開，淬滅逐漸解除，熒光逐漸升 高，10分鐘后穩(wěn)定。沒加可見光染料的反應無此現(xiàn)象。
10. 所有陽性對照有陽性結(jié)果（Ct在閾值以內(nèi)或反應液呈藍色），所有陰性對 照有陰性結(jié)果（Ct大于閾值或反應液呈淡藍色），否則提取實驗或擴增實 驗無效。需要尋找原因或跟廠家聯(lián)系，暫時不需要分析樣品的結(jié)果。
11. 如果陽性和陰性對照結(jié)果正常，則實驗有效，可以分析樣品的情況。如果 肉眼觀察，樣品管的顏色接近擴增陽性對照管則說明有擴增有靶分子，如 果接近無模板和無引物的陰性對照，則說明無擴增無靶分子。反應結(jié)果示 例如下（9為陰性，10為陽性）：
12. 如果是用熒光PCR儀，樣品Ct將小于閾值則為陽性，大于閾值則為陰性。
13. 當實時熒光檢測和可視化檢測同時使用時，如果不一致，以實時熒光 RT-LAMP的數(shù)據(jù)為準。一般可視化結(jié)果滯后實時熒光檢測結(jié)果20-30分 鐘，也就是說，在 qPCR 儀上第 30 分鐘時呈現(xiàn)陽性的樣品，其顏色變化 在第50-60分鐘時才能觀察到。
關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 免核酸純化病毒保存液，PCR級石蠟油
以下是天恩澤品牌部分熱銷產(chǎn)品，如需其他品牌產(chǎn)品請咨詢本店客服：
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品牌
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產(chǎn)品貨號
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貨品名稱
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規(guī)格
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天恩澤
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200101-50
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第二代病毒采運試劑盒（低敏型）原拭子病毒采運試劑盒，核酸診斷用
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50次/盒
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天恩澤
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200201-50
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第三代免提核酸提取病毒采運試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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200601-50
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熒光及可視化LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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200603-50
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熒光及可視化RT-LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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200108-2.5L
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xinguan病毒滅活液A型
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2.5L/瓶
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天恩澤
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91103-250
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非凍型拭子病毒保存液
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250ml/瓶
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天恩澤
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15-81920
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SARS-CoV-2冠狀病毒N基因探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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16-81920
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SARS-CoV-2冠狀病毒N基因熒光及可視化RT-LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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15-23000
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African Swine Fever Virus(ASFV)非洲豬瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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16-23000
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African Swine Fever Virus(ASFV)非洲豬瘟病毒LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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15-29420
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Yersinia pestis鼠疫耶爾森菌(鼠疫桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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71201-50
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柱式動物RNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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71001-50
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柱式病毒RNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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60705-50
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一管式植物DNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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3070-100
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動物RNA提取試劑盒（TRIzol）
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100mL/瓶
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天恩澤
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81027-50
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TRIzol伴侶
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50次/套
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天恩澤
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70701-50
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柱式病毒DNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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3674-50
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一管式病毒DNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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90404-50
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柱式植物RNA提取試劑盒2.0
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50次/套
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天恩澤
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60802-50
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柱式細菌DNA提取試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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71203-50
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柱式植物RNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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60602-50
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柱式植物DNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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90315-250
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非凍型尿液DNA保存液
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250mL/瓶
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天恩澤
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3660-250
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非凍型組織DNA保存液
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250mL/瓶
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天恩澤
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3060-250
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非凍型組織RNA保存液
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250m/瓶
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天恩澤
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90805-10
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即用型PCR試劑盒3.0
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1ml×10/盒
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天恩澤
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90708-1.5
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即用型高保真PCR試劑盒
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1.5mL/瓶
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天恩澤
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90408-1
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2X 染料法熒光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix）
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1ml/管
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天恩澤
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190303-1
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2X 探針法qPCR Mix （TaqMan探針法熒光定量PCR試劑盒）
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1ml/管
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天恩澤
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101005-100
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即用型易錯PCR試劑盒
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100次/套
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天恩澤
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160903-100
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可調(diào)式易錯PCR試劑盒
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100次/套
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天恩澤
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3090-250
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天凈沙RNase清除劑A型（原固相RNase清除劑）
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250mL/瓶
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天恩澤
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3091-1.5
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天凈沙RNase清除劑B型（原液相RNase清除劑）
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1.5mL/套
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天恩澤
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140648-250
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PCR污染清除劑
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250 mL/瓶
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天恩澤
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70902-1.5
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PCR級甜菜堿溶液，5M
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1.5mL/管
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天恩澤
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100805B-250
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Tris飽和酚-lvfang-yiwuchun混合液（DNA提取用）
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250ml/瓶
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天恩澤
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130502-50
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無內(nèi)毒素水
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50mL/瓶
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天恩澤
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160251-250
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4%中性甲醛固定液
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250mL/瓶
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天恩澤
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100302-100
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包涵體蛋白溶解及復性套裝
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100次/次
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天恩澤
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200604
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核酸釋放劑(DNA-RNA通用型)
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300次/盒
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天恩澤
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61202-10
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天凈沙核酸釋放劑
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10mL/瓶
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天恩澤
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70303-1.5
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綠如藍核酸染料（UV）
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1.5mL/管
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天恩澤
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70503
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DNA電泳分子量標準系列
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50次/管
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天恩澤
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小師弟
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高壓快速電泳預制膠
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10塊/盒
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