Quin 2試劑貨號：Q001
8-Amino-2-[(2-amino-5-methylphenoxy)methyl]-6-methoxyquinoline-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetrapotassium salt
CAS號：73630-23-6
商品信息
儲(chǔ)存條件：室溫
運(yùn)輸條件：室溫
分子式：
C26H23K4N3O10
分子量：
693.87
特點(diǎn)：
● 激發(fā)波長339nm，發(fā)射波長492nm
● 能夠輕易的穿過細(xì)胞膜
選擇規(guī)格：
50 mg
產(chǎn)品性狀
規(guī)格
性狀： 本產(chǎn)品為淡黃色粉末，可溶于水
純度（HPLC）: 95%以上
摩爾吸光系數(shù) ： 34,000 以上(240 nm附近)
水溶性： 符合要求
處理?xiàng)l件
保存方法 ： 避光，常溫
產(chǎn)品概述
Quin 2能夠和鈣（logKCaY=7.1）形成穩(wěn)定的熒光螯合物，但和鎂卻不行（logMgY=2.7）。這種螯合物在525 nm的發(fā)射波長處有著很高的量子產(chǎn)量（0.14），Quin 2的激發(fā)波長為339 nm，發(fā)射波長為492 nm。Quin 2-AM是Quin 2的乙酰甲酯衍生物，能夠輕易地穿過細(xì)胞膜。進(jìn)入細(xì)胞后，酯結(jié)構(gòu)立刻被水解，形成Quin 2。
原理
Quin 2能夠和鈣（logKCaY=7.1）形成穩(wěn)定的熒光螯合物，但和鎂卻不行（logMgY=2.7）。這種螯合物在525 nm的發(fā)射波長處有著很高的量子產(chǎn)量（0.14），Quin 2的激發(fā)波長為339 nm，發(fā)射波長為492 nm。Quin 2-AM是Quin 2的乙酰甲酯衍生物，能夠輕易地穿過細(xì)胞膜。進(jìn)入細(xì)胞后，酯結(jié)構(gòu)立刻被水解，形成Quin 2。
激發(fā)發(fā)射波長
E x ：339 nm
Em： 492 nm
溶解比例
溶解比例：84 mg/100 mL（水）
注意事項(xiàng)
1、試劑容易吸潮，從冰箱取出后，請確認(rèn)在干燥的環(huán)境放至室溫后再開封。由于試劑極其微量，開封前，請輕彈管壁幾次，以保證粉末落入管底。
2、第一次使用時(shí), 建議母液即配即用。試劑溶解后盡可能在短時(shí)間內(nèi)使用，以保證實(shí)驗(yàn)效果。
3、溶解液 DMSO 需要保證新鮮無水，否則將會(huì)導(dǎo)致 AM 體水解，使熒光染料無法進(jìn)入細(xì)胞，影響實(shí)驗(yàn)效果。
4、母液遇水極易分解，如果不能一次用完建議分裝保存，例如分裝成 5 μl/管，用封口膜封口，并用鋁箔紙包裹，放在一個(gè)密閉性能好的塑料袋中，并放入一包干燥劑，在≤-20℃密封避光保存。
5、建議您在正式實(shí)驗(yàn)前先摸索一下細(xì)胞量、鈣離子熒光探針的終濃度、培養(yǎng)時(shí)間等，找到最佳實(shí)驗(yàn)條件
文獻(xiàn)
1) R. Y. Tsien, “New Calcium Indicators and Buffers with High Selectivity against Magnesium and Protons: Design, Synthesis, and Properties of Prototype Structures”, Biochemistry, 1980, 19 (11), 2396.
2) R. Y. Tsien, T. Pozzan and T. J. Rink, “Calcium Homeostasis in Intact Lymphocytes: Cytoplasmic Free Calcium Monitored with a New, Intracellularly Trapped Fluorescent Indicator”, J. Cell Biol., 1982, 94, 325.
3) M. B. Feinstein, J. J. Egan, R. I. Sha’afi and J. White, “The Cytoplasmic Concentration of Free Calcium Inplatelets Is Controlled by Stimulators of Cyclic AMP Production (PGD2, PGE1, FORSKOLIN)”, Biochem. Biophys. Res. Commun., 1983, 113, 598.
4) N. Miyoshi, K. Hara, S. Kimura, K. Nakanishi and M. Fukuda, “A New Method of Determining Intracellular Free Ca2+ Concentration Using Quin 2-fluorescence”, Photochem. Photobiol., 1991, 53 (3), 415.
Q&A
| Q1:細(xì)胞內(nèi)檢測鈣離子的試劑種類都有什么，選擇什么樣的比較好呢？ |
| A1: 根據(jù)檢測儀器和檢測波長有很多的選擇，產(chǎn)品后面標(biāo)有AM的試劑是可以通過細(xì)胞膜的
有很多種相似的試劑，其特點(diǎn)如下：
【Fura 2】
?雙波長激發(fā)
激發(fā)(λex= Ca:340 nm, Ca free:380 nm)、發(fā)射：λem=500 nm
?解離常數(shù)：224 nmol/L
?因?yàn)槭菬晒鈴?qiáng)度的比值、可以有效的減小誤差
=>細(xì)胞內(nèi)Ca濃度計(jì)算。
?該試劑被使用的最多
?必須要更換過濾片、會(huì)耽誤一些時(shí)間。
【Fluo 3】
?單波長激發(fā)
激發(fā)：λex=508 nm、發(fā)射：λem=527 nm
?解離常數(shù)：400 nmol/L
?因?yàn)榧ぐl(fā)光在長波段，所以對細(xì)胞的損傷比較小
（不會(huì)受到NADH、NADPH的影響）
?可以使用Ar激光激發(fā)裝置。
?不適合切片中鈣離子的檢測
?【Fluo 4】
?單波長激發(fā)
?激發(fā)：λex=495 nm、發(fā)射：λem=518 nm
?解離常數(shù)：360 nmol/L
?與Fluo3相比對熒光強(qiáng)度更高。
?因?yàn)榧ぐl(fā)光在長波段，所以對細(xì)胞的損傷比較小
?（不會(huì)受到NADH、NADPH的影響）
?可以使用Ar激光激發(fā)裝置。 ?與Fluo3相比對細(xì)胞的毒性低
?【Indo 1】
?單波長激發(fā)
?激發(fā)：λex= 330 nm、發(fā)射(λem= Ca:410 nm, Ca free:485 nm)
?解離常數(shù)：250 nmol/L
?由于不需要更換濾光片，可以很快地檢測細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化以及像心肌細(xì)胞運(yùn)動(dòng)中鈣離子的變化
?（需要兩臺檢測儀器）
?【Rhod 2】
?單波長激發(fā)
?激發(fā)：λex=553 nm、發(fā)射：λem=576 nm
?解離常數(shù)：1.0 μmol/L
?因?yàn)榧ぐl(fā)光在長波段，所以對細(xì)胞的損傷比較小
?（不會(huì)受到NADH、NADPH的影響）
?可以使用Ar激光激發(fā)裝置。
?【Quin 2】
?單波長激發(fā)
?激發(fā)：λex=339 nm、發(fā)射：λem=492 nm
?解離常數(shù)：110 nmol/L
?最早開發(fā)的產(chǎn)品 |
?
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