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品牌: biomedworld 公司: 沃登醫學

提供商： 沃登醫學 服務名稱： 熒光素酶報告基因檢測

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熒光素酶報告基因檢測一、熒光素酶報告基因檢測服務介紹熒光素酶報告基因檢測是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中，會發出生物熒光(bioluminescence)。然后可以通過熒光測定儀也稱化學發光儀(luminometer)或液閃測定儀測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光。熒光素和熒光素酶這一生物發光體系，可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達。是檢測轉錄因子與目的基因啟動子區DNA相互作用的一種檢測方法。二、熒光素酶報告基因檢測服務內容1）用生物信息學方法分析并預測啟動子區可能的轉錄因子結合位點。2）設計引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動子片段，將此片段插入到熒光素酶報告基因質粒（pGL3-basic）中。3）篩選陽性克隆，測序。擴增克隆并提純質粒備用。4） 擴增轉錄因子質粒，提純備用。同時準備相應的空載質粒對照，提純備用。5） 培養293（或其它目的細胞），并接種于24孔板中，生長10-24小時（80%匯合度）。6） 將報告基因質粒與轉錄因子表達質粒共轉染細胞。7）提取蛋白并用于熒光素酶檢測。8） 加入底物，測定熒光素酶的活性。9） 計算相對熒光強度，并與空載對照比較。三、熒光素酶報告基因檢測服務說明1.客戶提供：含有熒光素酶報告基因的重組質粒（如需公司提供請說明）。2.服務周期：3-4周3.若另有疑問請致電本公司咨詢，我們將竭誠為您服務。四、熒光素酶報告基因檢測質量承諾1.權威的鑒定報告；2.原始的實驗數據；3.詳細的實驗步驟。