TOROGreen?qPCR Master Mix(QST-100P)
高穩定高GC染料法定量PCR Mix
目錄價: ¥750.00
規格:1mL×5 tubes/bag
高穩定高GC染料法定量PCR Mix
TOROGreen?qPCR Master Mix(QST-100P)
高特異性:高封閉Taq抗體和優化的PCR緩沖液雙重作用大大降低了引物二聚體的產生。
室溫穩定:在儲存和運輸過程中,性能不容易隨溫度變化而降低;完全室溫配制體系。
高GC擴增:優化的緩沖液配方可高效擴增GC 含量高達 80% 的模板,從而簡化引物設計。
寬線性范圍:可在8個模板梯度線性范圍內展示很高的重復性。
1.高穩定性驗證
將 pET28a質粒進行 8 個 10 倍梯度稀釋作為模板,使用 37℃ 下保存一周的 QST-100 和 -20℃ 下保存的 QST-100 同時對稀釋好的模板進行定量實驗,每孔加樣量 5 μL,擴增曲線和標準曲線如圖 1-a 和 1-b 所示:
圖1 高穩定性驗證
Fig.1 Validation of high stability
結果:從擴增曲線中可以看到 37℃ 下保存一周的 QST-100 和 -20℃ 下保存的 QST-100 擴增曲線一致,CT 值基本接近,從標準曲線中可以看到不同溫度下保存的試劑擴增效率均在 95%-100%之間,R2值均為 0.999。
結論:QST-100 具有極高的穩定性,同時具有卓越的擴增效率,在寬廣的模板量區間內具有優秀的線性關系。
2.QST-100 與國產 N 品牌特異性對比
將 pET28a質粒進行 8 個 10 倍梯度稀釋作為模板,使用 QST-100 和國產 N 品牌按照各自說明書推薦的體系(模板加樣量相同),使用同一程序同時對稀釋好的模板進行定量實驗,熔解曲線如下圖所示:
圖2 QST-100 與國產 N 品牌特異性對比
Fig.2 Comparison of specificitybetween QST-100 and Brand N
結果:從熔解曲線中可以看到,QST-100在低濃度和高濃度模板下均為單一峰值,而在低濃度模板下,國產 N 品牌出現了非特異性擴增。
結論:QST-100 熔解曲線峰值單一,具有高特異性,符合 MIQE 要求。
3.QST-100 與進口 T 品牌擴增效率對比
將 pET28a質粒進行 5 個 10 倍梯度稀釋作為模板,使用 QST-100 和進口 T 品牌按照各自說明書推薦的體系(模板加樣量相同),使用同一程序同時對稀釋好的模板進行定量實驗,擴增曲線和熔解曲線如圖 3-a 和 3-b 所示:
圖3 QST-100 與進口 T 品牌擴增效率對比
Fig.3 Comparison of amplification efficiency between QST-100 and Brand T
結果:從擴增曲線中可以看到在同一模板濃度下,QST-100 比進口 T 品牌起峰早,CT 值小。從熔解曲線中可以看到兩種試劑均沒有出現非特異性擴增, 但QST-100 的 Tm 值低于進口 T 品牌。
結論:在沒有非特異性擴增產生的情況下,QST-100 擴增效率高,且有利于高 GC 含量模板擴增。
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