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預染超低分子量蛋白質Marker(3.3kD-31.0kD)
英文名稱 | Prestained Protein Marker(3.3kD-31.0kD) |
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儲存條件 | -20℃保存,有效期為一年。避免反復凍融,建議分裝凍存 |
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產品簡介
本產品包含預染的3種多肽和2種低分子量蛋白質組成,分子量范圍為3. 3kD-31. 0kD。可以用于直接觀察蛋白質電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉膜效果。經Tricine-甘油SDS-PAGE凝膠電泳時以及轉移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5條藍色的蛋白條帶。本品為蛋白質和多肽混合物的凍干粉,每種預染蛋白含量約為40μg,配有一支1×上樣緩沖液。
使用說明:
1. 開封后,溶于200 μ11×上樣緩沖液,可根據需要進行小量分裝,每管10 μl,-20℃貯存,每次取一管使用,避免反復凍融。
2. 使用前取分裝后的小管室溫融化后即可上樣電泳。
示意圖:
凝膠制備及染色注意事項:
1. 先配制分離膠,聚合后再配制夾層膠,最后配制濃縮膠,3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時,30V跑1-2h后,待指示前沿到達分離膠上沿時,把電壓調至100V,至電泳結束,整個電泳過程大約需要6-8h。
2. 電泳之后可將膠置于固定液中固定20min,再進行染色,能得到較好的蛋白條帶;如時間不允許,也可不進行固定直接染色。如果使用配方7進行染色時效果不好或考慮其毒性,請選擇本公司的考馬斯亮藍蛋白膠快速染色液(貨號:P1300),該產品具有染色快,無毒,靈敏性高等特點,是常規染色液的替代品。
3. 由于多肽所含的氨基酸數目較少,因此如該多肽含有過多的極性氨基酸(堿性或酸性),則會影響其在SDS-PAGE圖上的條帶遷移率,即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。
4. 由于SDS-PAGE的圖譜上,蛋白質對數分子量和遷移率成正比直線關系的分子量范圍為15,000-200,000,因此對于分子量小于10000的蛋白質或多肽的分子量,只能根據標準分子量進行估計,推斷其是否落入預測的分子量范圍。
5. 由于超低分子量多肽(3000及3000以下),極易從凝膠上浸出,因此染色及脫色時間不宜太長,脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過久,否則條帶會消失。

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