AEC顯色試劑盒(20×)-WesternBlot-蛋白與免疫
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AEC顯色試劑盒(20×)| 英文名稱 | AEC Peroxidase Substrate Kit,20× |
|---|---|
| 儲存條件 | 2-8℃避光保存，復檢期至少1年。 |
| 單位 | 盒 |
內容成分：
溶液A濃縮液（20×）1ml/10ml
溶液B濃縮液（20×）1ml/10ml
溶液C濃縮液（20×）1ml/10ml
產品簡介：
AEC底物顯色試劑是一種可以通過過氧化物酶催化底物3－氨基－9－乙基咔唑氧化形成紅色不溶性產物，以此鑒定過氧化物酶活性，從而確定目標分子表達情況，該種方法權威而經典。其適用于辣根過氧化酶標記蛋白的免疫學檢測（蛋白質免疫印記、免疫組織化學、以及原位雜交染色等）。產品性能穩定，操作便捷，敏感度高，顯色清晰，重復性好。
3－氨基－9－乙基咔唑（3-amino－9－ethylcarbazole；AEC）是過氧化物酶（Peroxidase）的生色底物，其分子式為C14H14N2，分子量為210.3。在過氧化物酶的催化下，電子供體AEC底物在過氧化氫氧化下，失去電子而呈現出顏色變化和沉積，形成穩定性紅色不溶性產物（能溶于有機試劑）。
3-氨基-9-乙基咔唑(3-amino-9-ethylcarbazole，AEC) 是過氧化物酶(Peroxidase) 的生色底物，在過氧化物酶的催化下，過氧化氫氧化AEC形成穩定的紅色沉淀產物。該紅色產物不溶于水，但溶于有機溶劑。該AEC底物顯色試劑盒加入了增強顯色試劑，敏感度大大提高。產品操作便捷，顯色清晰，重復性好，適用于HRP系統的IHC 和Western Blot實驗的酶促顯色。
使用說明：
1．工作液配制：
取850ul無菌雙蒸水，依次加入50ul溶液A、50 ul溶液B、50ul溶液C、混合均勻，即配成AEC工作液。如需要更大體積工作液，可按相應比例放大。此溶液必須現用現配，配好后避光保存，半小時內使用，過期后請將剩余的液體廢棄。
2．顯色：
1）蛋白質印跡膜顯色：將配制好的工作液滴加在印跡膜上（或將印跡膜浸入AEC工作液中），顯色時間一般為10-30min。顯色完畢后，將膜浸入蒸餾水中，終止反應。
2）組織切片染色：向組織切片上加入適量AEC工作液，確保能充分覆蓋樣品。室溫孵育10-30 min，避免光照，直至顯色至預期深淺。可在顯微鏡下觀察控制顯色時間。顯色后用蒸餾水洗滌即可終止顯色反應。
3）對于組織切片或細胞樣品，顯色反應終止后，可對其進行其他染料復染。對于膜，顯色反應終止后，可以室溫晾干避光保存。
注意事項：
1.由于AEC生成的顏色產物為脂溶性，因此用于IHC顯色后不適合梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片，須用水性封片劑封片。
2.根據情況自行優化實驗條件，調整顯色時間，獲得最佳顯色效果。
3.AEC有一定毒性，操作時請采取必要的防護措施。
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