2周標(biāo)準(zhǔn)鼠單抗佐劑-蛋白與免疫
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2周標(biāo)準(zhǔn)鼠單抗佐劑| 別名 | 2周快速鼠多抗制備佐劑 |
|---|---|
| 英文名稱 | SoFastAntibody-Mouse2W |
| 儲存條件 | 2-8oC 切勿凍存！ |
| 單位 | 瓶 |
用途：
通過 2 周 2 針的快速免疫程序快速制備小鼠多克隆抗體，ELISA 滴度（Cutoff 值為0.1000）可達(dá)到 1:1000-1:10000 或更高。
備注：
常溫運(yùn)輸，2-8oC 保存，無菌取用，有效期 12 個月。（切勿凍存！）
使用方法：
1. 用生理鹽水將抗原稀釋到 2 倍最終濃度（按每針次 50μl 用量配制）。備注：推薦使用的抗原用量為（1）免疫原性較弱的亞單位蛋白抗原每針次 5-20μg；（2）免疫原性較強(qiáng)的滅活全病毒或全細(xì)菌以及病毒樣顆粒抗原每針次 1-5μg；（3）偶聯(lián)了載體蛋白的小分子抗原每針次 20-50μg。
2. 充分混勻佐劑，無菌條件下取出所需用量（按每針次 50μl ）與抗原按體積比 1:1 迅速混勻。備注：本佐劑產(chǎn)生沉淀屬正常現(xiàn)象，與抗原混合操作越快越好。
3. 通過后腿小腿肌肉注射免疫小鼠，每只小鼠左、右腿各注射 1 針，每針次 100μl。 。備注：本佐劑與抗原混合后產(chǎn)生沉淀屬正常現(xiàn)象，抽入針管前應(yīng)充分混勻，抽入針管后應(yīng)盡快注射。 4. 第 14 天采微量尾血進(jìn)行 ELISA 測定，抗體滴度應(yīng)達(dá)到 1:1000-1:10000 或更高，隨后即可采全血。
與常規(guī)使用的弗氏佐劑相比，SoFastAntibody免疫佐劑具有免疫周期短、針次少、無需乳化、抗原用量低、抗體滴度高、抗體親合力高、易獲得構(gòu)象型表位的抗體等多方面優(yōu)點(diǎn)，詳述如下： 1.SoFastAntibody只需兩針免疫，無論是用于單克隆還是多克隆抗體制備，與弗氏佐劑相比可減少免疫針次。 2.SoFastAntibody通過減少免疫針次和降低每針次抗原用量，從而可大大節(jié)省總抗原用量。推薦使用的抗原用量為（1）免疫原性較弱的亞單位蛋白抗原每針次5-50μg（通常為小鼠5-20μg，兔子20-50μg）；（2）免疫原性較強(qiáng)的滅活全病毒或全細(xì)菌以及病毒樣顆粒抗原每針次1-10μg（通常為小鼠1-5μg ，兔子5-10μg）。 3.SoFastAntibody抗體產(chǎn)生快，抗體滴度高，抗體親合力高。以標(biāo)準(zhǔn)免疫程序為例，無論是用于單克隆還是多克隆抗體制備，只需要在三周內(nèi)進(jìn)行兩針免疫，通常在第五周即可獲得ELISA滴度（Cutoff值為0.1000）高達(dá)1:10000-1:10000000的高親合力抗體水平。 4.SoFastAntibody不破壞抗原天然構(gòu)象，從而易于篩選獲得針對構(gòu)象型抗原表位的單克隆抗體，這是弗氏佐劑所不具備的一個重要特點(diǎn)。 5.SoFastAntibody是一類水溶性佐劑，使用時不需要弗氏佐劑的復(fù)雜乳化過程，抗原和佐劑只需簡單混合即可用于免疫動物。 6.SoFastAntibody使用肌肉免疫途徑，與常規(guī)小鼠單克隆抗體制備過程中使用足墊免疫或脾內(nèi)免疫相比，極大地方便了使用。 7.SoFastAntibody的一個重要用途是可方便地用于制備小鼠多克隆抗體。常規(guī)多克隆抗體制備多使用兔子，不但免疫針次多、抗原用量大和抗體產(chǎn)生慢，而且由于技術(shù)要求較高而往往需要委托專門單位制備。使用SoFastAntibody免疫佐劑，任何實(shí)驗動物人員均可方便快速地制備小鼠多克隆抗體，標(biāo)準(zhǔn)免疫程序只需要簡單地免疫5只小鼠，即可在五周后獲得1ml高質(zhì)量的小鼠多克隆抗體。（強(qiáng)烈推薦使用本佐劑制備小鼠多克隆抗體，1ml高質(zhì)量的小鼠多克隆抗體足以滿足絕大多數(shù)用戶的實(shí)驗需求，包括用于酶聯(lián)免疫、免疫印跡、流式細(xì)胞、免疫組化和免疫沉淀等）。 8.SoFastAntibody建議常溫運(yùn)輸，2~8oC保存，無菌取用，有效期12個月。
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