SYBRGreenI(10000×)-核酸電泳/marker-分子生物學(xué)
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| 別名 | SYBR Green I(10000×) |
|---|---|
| 英文名稱 | SYBR Green I(10000×) |
| 儲(chǔ)存條件 | 應(yīng)避光存放，原液保存于-20℃ |
| 單位 | 支 |
規(guī)格：50/100ul
保存：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
采用瓊脂糖電泳檢測(cè)雙鏈DNA時(shí)，SYBR GreenⅠ是最靈敏的熒光染料，當(dāng)其結(jié)合到核酸上時(shí)，會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的熒光及高量子產(chǎn)額，DNA/SYBR GreenⅠ復(fù)合物的量子產(chǎn)額均為0.8。由于與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生很強(qiáng)的信號(hào)，背景極低，并且對(duì)核酸的親和力高，因此SYBR染料可在低濃度條件下使用。SYBR GreenⅠ的最低檢出限：20pg DNA(254nm); 60pg DNA(300nm 紫外透射)；此外，SYBR GreenⅠ還可以用于檢測(cè)寡核苷酸(1-2ng,300nm 紫外透射)，比EB靈敏20至100倍。SYBR GreenⅠ用于電泳檢測(cè)DNA時(shí)，既可預(yù)染，也可電泳后再進(jìn)行染色。SYBR GreenⅠ用于瓊脂糖電泳檢測(cè)DNA后，可直接將DNA轉(zhuǎn)移至膜上，進(jìn)行后續(xù)核酸印跡雜交反應(yīng)。此外，SYBR GreenⅠ與DNA的結(jié)合對(duì)多種常用的限制性內(nèi)切酶活性無(wú)抑制作用，可直接進(jìn)行消化或連接。
使用說(shuō)明：
該產(chǎn)品使用方法同EB.點(diǎn)染法：用于瓊脂糖凝膠電泳：取原液1ul加入TE緩沖液或滅菌雙蒸水1ml，再加入6×DNA Loading buffer上樣緩沖液1ml混勻，(此時(shí)溶液為1：2000稀釋，即為工作液)電泳時(shí)取1-2ul工作液和5ul電泳樣品混勻后靜置5min后直接上樣。 膠染法：常規(guī)配置瓊脂糖凝膠100ml，加熱至融化，待溫度將至50-70℃（感覺(jué)不燙手）加入該原液10ul。待膠凝固后即可電泳，電泳結(jié)束后即可在紫外照射下觀察。
注意事項(xiàng)：
1. SYBR GreenⅠ應(yīng)避光存放，原液保存于-20℃；建議分裝凍存，短期可以4℃保存。
2. 膠染法靈敏度較高，須將商品化的DNA marker稀釋5-10倍后使用。
3. 在預(yù)染色方法中，電泳時(shí)間不要超過(guò)2小時(shí)，否則SYBR GreenⅠ會(huì)從DNA上分離出來(lái)，會(huì)產(chǎn)生彌散狀條帶。
4. 在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過(guò)程中，SYBR Green I 可以全部從雙鏈核酸上去掉。
5. 在紫外照射透視下，與雙鏈DNA 接合的SYBR Green I 呈現(xiàn)綠色熒光。如果膠中含有單鏈DNA 則顏色為橘黃而不是綠色。
6. SYBR Green對(duì)玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過(guò)程中用聚丙烯類容器。
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