Monarch基因組DNA細(xì)胞裂解緩沖液貨號#T3012LNEB酶試劑NewEnglandBiolabs
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產(chǎn)品資料 – 核酸純化 – 基因組DNA提取Monarch 基因組 DNA 細(xì)胞裂解緩沖液 收藏 貨 號規(guī) 格 價(jià) 格(元) 北京庫存上海庫存廣州庫存成都庫存蘇州庫存#T3012L20 ml589.00 無無無無無Download: isoschizomers|compatible ends|single letter code特性從多種樣本（細(xì)胞、血液、組織和其他）中提取高質(zhì)量gDNA極低的 RNA 殘留（通常＜ 1%）提取的 gDNA 片段更長（最高峰值≥50kb）操作便捷友好，提取快速，裂解充分試劑盒可以純化基因組DNA試劑盒組分可以單獨(dú)購買 Monarch基因組 DNA 提取試劑盒是NGS實(shí)驗(yàn)中NEBNext建庫產(chǎn)品的完美補(bǔ)充。提取的長片段DNA，是長讀長測序平臺(tái)的上游純化的首選。
概述Monarch基因組 DNA 提取試劑盒是NGS實(shí)驗(yàn)中NEBNext建庫產(chǎn)品的完美補(bǔ)充。提取的長片段DNA，是長讀長測序平臺(tái)的上游純化的首選。
Monarch 基因組 DNA（gDNA）提取純化試劑盒集細(xì)胞裂解、RNA 去除和完整 DNA 純化為一體，可用于多種生物樣品如培養(yǎng)細(xì)胞、血液和哺乳動(dòng)物組織。對難裂解的樣品如細(xì)菌和酵母，試劑盒提供加強(qiáng)裂解步驟，以獲得裂解充分的樣品。說明書中還詳述了臨床樣品如唾液和頰粘膜拭子的 gDNA提取過程，對于已經(jīng)提取的 gDNA樣品，說明書同樣詳述了快速純化步驟。提取的 gDNA具有最高質(zhì)量，通常A260/280＞1.8、A260/230＞2.0、高DIN 分值和極低殘留 RNA。本試劑盒提取的 gDNA適用于終點(diǎn) PCR、qPCR 和NGS 文庫制備等多種下游應(yīng)用。 峰值片段大小一般是50-70kb，特別適用于長讀長測序平臺(tái)。組分Monarch基因組 DNA提取試劑盒組分-Monarch 基因組 DNA 純化柱-Monarch 收集管II-Monarch基因組 DNA 組織裂解緩沖液-Monarch基因組 DNA 細(xì)胞裂解緩沖液-Monarch基因組 DNA 血液裂解緩沖液-Monarch基因組 DNA 結(jié)合緩沖液-Monarch 基因組 DNA 洗滌緩沖液-Monarch 基因組 DNA 洗脫緩沖液-Monarch RNase A-蛋白酶 K，分子生物學(xué)級Monarch 基因組 DNA 提取試劑盒可以從多種樣本中高效提取高質(zhì)量、高分子量的基因組DNA。每個(gè)樣本各取100 ng基因組DNA，用0.75%瓊脂糖膠電泳上樣。血液、培養(yǎng)的細(xì)胞和組織用標(biāo)準(zhǔn)說明書，頰粘膜拭子、唾液、革蘭氏陰性菌和陽性菌用補(bǔ)充說明書進(jìn)行提取。起始材料：1X106Hela 細(xì)胞、100 μl人類血液、10 μl鳥類血液、10 mg冷凍組織粉末、1個(gè)頰粘膜拭子、500 μl唾液和～ 1X109 細(xì)菌細(xì)胞。使用Lambda DNA-Hind III digest (NEB #N3012)作為 marker 上樣于最后一條泳道。提取出的 gDNA 樣本用Genomic DNA ScreenTape® ，在 Agilent Technologies® 4200 TapeStation® 上進(jìn)行分析。樣本通常產(chǎn)量峰值在 50-70 Kb之間，DINs在9左右。在準(zhǔn)備頰粘膜拭子和唾液的過程中，不可避免會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞破損，這會(huì)導(dǎo)致形成彌散狀的低分子量凋亡條帶。Monarch基因組 DNA提取試劑盒提取出的高質(zhì)量基因組DNA適用于長片段PCR 和 qPCR 等靈敏下游實(shí)驗(yàn)。
A:每個(gè)樣本用 25ng 人DNA作為模板，用 LongAmp® Hot Start Taq 2X Master Mix（NEB #M0533）和特異引物分別擴(kuò)增出6、8、10、12 、16 、20 kb的擴(kuò)增子產(chǎn)物。PCR反應(yīng)在Applied Biosystems® 2720 熱循環(huán)儀中進(jìn)行。Hela細(xì)胞 DNA 和人源血液基因組 DNA 用 Monarch試劑盒提取，與商業(yè)化的人源細(xì)胞系 NA19240 F11 參照 DNA 進(jìn)行比較。分別取 10 ul上樣于1.5%的瓊脂糖膠，用 1 kb DNA Ladder（NEB #N3232）作為 Marker。膠圖結(jié)果顯示DNA高度完整，非常適合長片段PCR。B：從人全血、Hela細(xì)胞和小鼠鼠尾用Monarch試劑盒提取基因組 DNA，10 倍系列稀釋 5 次作為起始 DNA 模板濃度。在Bio-Rad® CFX Touch qPCR thermal cycler儀器中，用Luna® 通用 qpcr預(yù)混液(NEB#M3003) 和 特異引物對gHEME(人類全血)和gREL（Hela,小鼠鼠尾）進(jìn)行PCR檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示 DNA 具有高純度，不含抑制劑，非常適合qPCR。
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