BD細胞凋亡雙染試劑盒AnnexinV-FITC/PI簡單介紹：
在正常細胞中，***脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質雙層的內側，細胞發生凋亡zui早期，膜***脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內側翻向外側，這一變化早于細胞皺縮、染色質濃縮、DN**斷化和細胞膜的通透性增加等凋亡現象。AnnexinV是一種***脂結合蛋白，與***脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細胞外側暴露的***脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此AnnexinV被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。***化丙***（Propidium Iodide,PI）是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，但凋亡中晚期的細胞和死細胞由于細胞膜通透性的增加，PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此將Annexin V與PI匹配使用，就可以將處于不同凋亡時期的細胞區分開來。
BD細胞凋亡雙染試劑盒AnnexinV-FITC/PI
組成成分：
Product code Description556547 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit IComponents:556547a Annexin V Binding Buffer, 10X conc (51-66121E556547b Annexin V-FITC (51-65874X)556547c Propidium Iodide Staining Solution(51-66211E)
操作步驟：
貼壁細胞需用0.25%的胰酶消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的胰酶消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的胰酶消化收集后（注：胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上***脂酰絲氨酸與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
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