qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit（1000*50ul）
使用SYBR Green I進行兩步法RT-PCR，用于基因表達分析
整合熱啟動，PCR特異性高可靠定量檢測低豐度轉錄本準確定量檢測各種起始量樣本提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）兩種包裝無需優化反應和循環條件
qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit（1000*50ul）
Real-Time PCR酶與試劑盒qPCR16一步法RT-PCR20兩步法RT-PCR29QuantiTect SYBR
®Green PCR Kits
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使用SYBR Green I進行兩步法RT-PCR，用于基因表達分析
整合熱啟動，PCR特異性高可靠定量檢測低豐度轉錄本準確定量檢測各種起始量樣本提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）兩種包裝無需優化反應和循環條件
QuantiTect SYBR Green PCR Kit使用SYBR Green I通過兩步法real-time RT-PCR對cDNA目標序列進行高特異性的定量檢測。熱啟動和*的實時定量PCR緩沖液確保了對cDNA目標序列高特異性和靈敏度的real-time定量檢測。dNTP混合液含有dUTP，可選擇性進行UNG處理。為便于使用，預混液可儲存在2–8°C。
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特異性定量檢測。
在Rotor-Gene 3000上使用針對人BAX的QuantiTect Primer Assay和的試劑盒分析稀釋的人白細胞cDNA。熔解曲線分析中出現單峰，NTC反應呈平直曲線，說明使用QuantiTect Kit和Assay可實現高特異性定量。NTC：無模板對照。Norm. Fluoro.：標準化的熒光。
Performance
QuantiTect SYBR Green PCR Kit在寬泛的范圍內符合線性規律，可實現特異性定量檢測（參見"Specific quantification over a wide linear range"）。與其他聚合酶相比，HotStarTaq DNA Polymerase具有嚴格的熱啟動，進一步提高了PCR反應的特異性。*的PCR緩沖液和HotStarTaq DNA Polymerase，確保低豐度轉錄本的定量檢測，低至5個拷貝的目標序列也可被準確檢測（參見"Highly specific amplification"）。QuantiTect SYBR Green PCR Kit與QuantiTect Reverse Transcription Kit和QuantiTect Primer Assays配合使用，可獲得靈敏、可靠的結果（參見"Specific and sensitive quantification"）。
QuantiTect SYBR Green PCR +UNG Kit中經特別優化的UNG溶液配合經驗證的PCR預混液可有效避免PCR產物中的殘留污染，并對靶序列進行可靠的定量檢測（參見"High specificity in real-time PCR"）。
Principle
QuantiTect SYBR Green PCR Kit含有優化的即用型預混液，可使用SYBR Green I對cDNA靶序列進行高特異性和靈敏度的real-time定量分析。預混液中的熒光染料SYBR Green I可對很多不同的靶序列進行分析，無需合成靶標特異性標記引物。*的PCR緩沖液含有K+和NH4+，能促使特異性引物退火，獲得高PCR特異性和靈敏度（參見"Specific primer annealing"）。此外，HotStarTaq DNA Polymerase具有嚴格的熱啟動，可防止非特異性產物的形成。
QuantiTect SYBR Green PCR預混液含有dUTP，可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶 （UNG）預處理，保證之前反應殘留的PCR產物會影響后續的PCR反應。
2x QuantiTect SYBR Green PCR Kit的組份| 組份 | 特點 | 優勢 |
|---|
| HotStarTaq DNA Polymerase | 95ºC孵育15分鐘即可活化 | 室溫下即可構建qPCR反應體系 |
| QuantiTect SYBR Green PCR Buffer | NH4+和K+的平衡組合 | 特異性引物退火確保PCR結果可靠 |
| dNTP mix | 含有dUTP，會部分替代dTTP，可進行UNG處理 | 可選擇進行UNG處理，以消除之前反應殘留的PCR產物 |
| SYBR Green I dye | DNA雙鏈結合時，生成強烈的熒光信號 | 高度靈敏的定量檢測 |
| ROX dye | 在Applied Biosystems或Agilent的PCR儀上進行熒光信號校準 | 可在需要ROX染料的PCR儀上進行準確的定量檢測。不會干擾其他real-time PCR儀 |
Procedure
QuantiTect SYBR Green PCR Kit無需進行繁瑣耗時的反應條件優化。只需簡單地將引物、探針和cDNA模板加入到即用型PCR預混液中，即可開始反應（參見"Two-step RT-PCR"）。使用操作手冊中的實驗方案可在任何real-time PCR儀上得到快速、可靠的結果。如果需要，反應液可用尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）預處理，以去除之前反應殘留的PCR產物。
為在兩步法real-time RT-PCR中獲得理想結果，我們推薦使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。此試劑盒可在20分鐘內快速合成cDNA，并可去除基因組DNA污染。
QuantiTect SYBR Green PCR Kit配合QuantiTect Primer Assays可在基因表達分析中獲得高度特異性的結果。基因組范圍、生物信息學驗證的引物對覆蓋所有人類、小鼠、大鼠和其他各類生物基因。QuantiTect Primer Assays可在GeneGlobe上方便地訂購。
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