簡要描述：
登革熱IgM/IgG抗體檢測試劑盒登革熱病毒是黃病毒屬，主要分布于熱帶和亞熱帶地區。世界上一半以上的人口居住于具有登革熱潛在傳播風險的地區，登革熱是導致人類發病和死亡嚴峻的蟲媒病毒疾病1。登革熱病毒有4種不同但抗原相關的血清型，通過雌蚊（主要是埃及伊蚊、白紋伊蚊傳播和波利尼西亞斑蚊）傳播。
登革熱IgM/IgG抗體檢測試劑盒
澳洲PANBIO登革熱抗原NS1快速檢測用于定性的快速檢測人群血清、血漿或全血中登革病毒的IgM及IgG抗體?？稍?5分鐘內檢測結果。
· 結果快速，15分鐘出結果。· 結果值得信賴，敏感性和特異性均> 90%· 方式靈活，樣本可為全血、血清或血漿· 能區分出登革的原發感染和繼發感染· 可進行完整的測試，保存方便，常溫2-30℃保存
標本采集和制備
靜脈穿刺獲取的血液應該置于室溫（20-25℃）下直到凝塊形成，再按照臨床實驗室標準化研究院（CLSI）的《認可標準——診斷用血液標本的靜脈穿刺采集程序，H3》離心。應該盡快分離血清。如果在2天內不進行檢測，血清應該2-8℃冷藏或者低于或等于- 20℃冷凍儲存。不*使用自解凍冷凍機儲存血清。不*使用黃疸血清，以及出現溶血、脂血或微生物生長的血清。CLSI提供了儲存血液標本的建議，《認可標準——血液標本的處理加工程序，H18》。
檢測程序
注： 確保所有試劑在開始測定前平衡至室溫（20-25℃）。在所給時間和溫度范圍以外進行測試可能產生無效的結果。不在預定時間和溫度范圍內的測試必須進行重復。
ELISA程序
從鋁箔袋中取出所需數量的微孔板并插入測試條槽。陰性質控品、陽性質控品和校準品各需5個微孔，一式三份。確保剩下未使用的微孔密封于鋁箔袋內。使用適當的試管或微滴定板稀釋陽性質控品（P）、陰性質控品（N）、校準品（CAL）和患者樣本?；旌?0μL血清與1000μL樣本稀釋劑?；旌暇鶆?。
或者，
混合10μL血清與90μL樣本稀釋劑。取出20μL稀釋血清，加入180μL樣本稀釋劑?；旌暇鶆颉Ｎ?00 µL樣本稀釋劑、質控品和校準品添加至對應的微孔中。蓋住測定板并在37°C ± 1°C孵育30分鐘。用稀釋后的清洗緩沖液洗6次（參考清洗程序）。吸取100 µL HRP標記抗人IgG添加到每個微孔中。蓋住測定板并在37°C ± 1°C孵育30分鐘。用稀釋后的清洗緩沖液洗6次（參考清洗程序）。吸取100µL TMB添加到每個孔中。在室溫（20-25℃）下孵育10分鐘，從第①次添加開始計時。藍色將會顯現。按照相同順序吸取100μL終止液添加到每個孔中，計時同TMB添加步驟。混合均勻。藍色將變成黃色。在30分鐘內讀取每個孔在450nm波長的吸光度，參考濾波器為600-650nm。
注： 如果使用雙波長分光光度計，將參考濾波器設定在600-650nm之間。在沒有參考濾波器的情況下讀取450nm的微孔結果可能由于背景原因導致吸光度偏高。
清洗程序
為了清除未復合的樣本或成分，有效清洗是ELISA程序的關鍵步驟。
A.自動洗板機
徹底抽凈所有微孔。在清洗循環期間將每個孔裝滿至邊緣（350μL）。完成6次清洗后，將測定板倒立于吸水紙巾上用力敲打，確保清除所有清洗緩沖液。為了確保有效清洗，必須維持自動洗板機良好的保養。必須始終遵守廠商的清潔說明。
B.手動清洗
將測定板的內含物丟棄到適當的廢物容器。用適當的擠壓瓶將微孔填滿清洗緩沖液。避免清洗緩沖液起泡，否則會降低清洗效率。立即丟棄微孔里的清洗緩沖液。再將微孔填滿清洗緩沖液，并立即丟棄。重復步驟（3）4次，共用清洗緩沖液清洗六（6）次。后一次清洗完成后，丟棄微孔的內含物并將測定板置于吸水紙巾上敲打，以確保清除所有清洗緩沖液。
質量控制
每個試劑盒包含校準品，陽性質控品和陰性質控品。這些組成的可接受值參見附帶的規格表。陰性質控品和陽性質控品用于監測重大的試劑失敗。陽性質控品不能確保測定臨界值的精密度。如果質控品或校準品的任一吸光度讀數不符合規定，則測試無效且應重新測試。如果測試無效，則不能報告患者結果。必須按照地方、州和/或聯邦法規或認證要求以及實驗室標準QC程序執行質控（QC）要求。有關適當的QC操作規程指南，建議用戶參考CLSI C24-A和42 CFR 493.1256。
預期值和測試局限性
必須結合患者的臨床體征和癥狀來做臨床診斷。該試劑盒的結果本身并沒有診斷作用，應該與其他臨床數據和患者癥狀聯用。陽性預測值取決于病毒存在的可能性。只能檢測有臨床癥狀或疑似接觸過相關病毒的患者。黃病毒屬內的血清型交叉反應（登革熱1、2、3、4，日本腦炎，西尼羅河病毒，墨累山谷腦炎等）在IgG， 水平上十分常見
3,4,5。在東南亞進行的試驗表明90%的日本腦炎患者（n=20）的IgG間接結果大于10 Panbio單位。利用地方人群測定了臨界值。人群血清流行病學在不同地理區域應該隨時間而變化。終，臨界值需要根據對當地的研究進行調整。尚未確定目測結果判定的性能特征。ELISA篩選試驗結果表明登革熱感染的所有血清必須送到參考實驗室進行陽性確認和流行病學記錄。
性能特征
用Panbio Dengue IgG Indirect ELISA對386份經過血凝抑制試驗（HAI）和ELISA方法的回顧性血清進行檢測。這些血清包括來自以下組別的樣本：108份血清陰性樣本、84份原發性樣本、94份繼發性樣本和100份地方性樣本。通過Panbio Dengue IgG Indirect ELISA 對這些血清樣本進行檢測并將其結果與血清的登革熱感染狀態進行對比，從而確定檢測的靈敏度、特異性和一致性。
馬來西亞的一所大學通過基于世界衛生組織（WHO）標準的HAI試驗將115份血清樣本確定為原發性或繼發性登革熱感染。該試驗組由23份原發性和92份繼發性登革熱樣本構成。
登革熱IgM/IgG抗體檢測試劑盒
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