天恩澤可調式易錯PCR試劑盒 160903-100，產品簡介：產品品牌：天恩澤產品名稱：可調式易錯PCR試劑盒英文名稱：Controlled Error-prone PCR Kit產品貨號：160903-100產品規格：100次產品價格：1900元
天恩澤可調式易錯PCR試劑盒 160903-100
我們上海金山科研平臺公司作為天恩澤公司的代理商，先簡單介紹一下天恩澤公司：
北京天恩澤公司的目標是研發出技術先進、質量穩定、價格合理的試劑精品。公司的創立宗旨是技術至上、質量至上、服務至上，公司的產品研發團隊均為高學歷并在海外有長期的科研經驗；公司的管理團隊已在行業內擁有超過20年管理經驗；同樣，公司的運營團隊也有豐富的執行經驗。
北京天恩澤公司充分了解客戶的需求，并努力創新以滿足客戶不斷發展的需求。我們將與我們的客戶共同成長，成為生物技術領域中zhuoyue產品和服務的jijia提供者。
DNAout、RNAout、Erasol、天凈沙、克必隆、歸去來、好亦多均為天恩澤基因注冊商標(試劑類)。
天恩澤可調式易錯PCR試劑盒 160903-100，產品簡介：
產品品牌：天恩澤
產品名稱：可調式易錯PCR試劑盒
英文名稱：Controlled Error-prone PCR Kit
產品貨號：160903-100
產品規格：100次
產品價格：1900元
運輸：低溫
保存：-20℃保存
有效期：1年
貨期：1-2天
產品介紹：
可調節突變率
天恩澤可調式易錯PCR試劑盒 160903-100，產品特點：
易錯PCR（error-prone PCR）是利用Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性，
在一定條件下（如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在）能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法，則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規PCR的比較如下：
本產品是在本公司的易錯 PCR試劑盒基礎上改進而得，本產品具有下列特點：
1. 即開即用，十分簡單方便，尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的優越性。
2. 配方經過精心優化，實驗人員在一定范圍內可以控制突變率，一輪 PCR 的突變率范圍在2-8突變/1000bp，更高的突變率可以通過多輪PCR達到。
3. 可用于連續易錯 PCR（sequential error-prone PCR），只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯PCR的模板即可，使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
4. 可以擴增的 DNApian段更長，達到2kb，對于2kb 以上的產物，建議分段擴增。
5. 本試劑盒足夠100 次30uL 體系的易錯PCR。
本產品是在本公司的易錯 PCR試劑盒基礎上改進而得，本產品具有下列特點：
1. 即開即用，十分簡單方便，尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的優越性。
2. 配方經過精心優化，實驗人員在一定范圍內可以控制突變率，一輪 PCR 的突變率范圍在2-8突變/1000bp，更高的突變率可以通過多輪PCR達到。
3. 可用于連續易錯 PCR（sequential error-prone PCR），只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯PCR的模板即可，使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
4. 可以擴增的 DNApian段更長，達到2kb，對于2kb 以上的產物，建議分段擴增。
5. 本試劑盒足夠100 次30uL 體系的易錯PCR。
規格及成分
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成 份
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編 號
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十孔盒包裝
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易錯PCR Taq DNA 聚合酶（5U/uL）
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101005c
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50 uL（紅色蓋）
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易錯PCR Mix 2.0，10×
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160903a
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300 uL（黃色蓋）
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易錯 PCRdNTP 2.0，10×
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160903b
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300 uL（白色蓋）
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易錯PCRMnCl2
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160903c
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300 uL（紫色蓋）
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易錯PCRdGTP
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160903d
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300 uL（藍色蓋）
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超純水
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100935
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1 mL（本色蓋）
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使用手冊
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160903sc
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1 份
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運輸及保存：低溫運輸，-20℃保存, 有效期為一年。
自備試劑：引物、DNA模板、常規 PCR 試劑盒。
使用方法：
1. 將引物稀釋到10uM。引物也是決定易錯 PCR 成敗的關鍵因素，設計引物時要保證其Tm 在 70℃，長度在 25-30nt 之間，GC 含量在45%-60%之間，3 端 GC 含量低，并且沒有發夾結構。
2. 用自備易錯 PCR 引物和常規 PCR 試劑擴增制備易錯 DNA 模板（常規 PCR 產物），膠回收并準確確定濃度。注意：易錯 PCR 的模板一定要用膠回收的常規 PCR 產物，因為膠回收會可以把電泳不可見的非特異性擴增片段去除，否則這些片段由于也是用易錯 PCR 引物擴增所得，在易錯 PCR擴增時也會被擴增，產生競爭抑制，降低靶分子的擴增效率。如果常規PCR制備模板的引物和易錯 PCR 引物不同（類似巢式 PCR）則可以避免此問題，但需要合成兩對引物。
3. 將回收的 DNApian段（模板）稀釋到1ng/uL 、10ng/uL 和100ng/uL三個濃度。注意：模板使用量是影響突變率的重要因素，模板 DNA 為非突變 DNA，擴增產生的 DNA 為突變 DNA，易錯PCR體系終 DNA 量是基本固定的，因此模板 DNA 使用量越大，則突變 DNA在終產物中的相對比例就越低，突變率就越低。反之亦然。但模板太少又不容易擴增成功，所以建議同時測試兩個模板用量。如果都成功，則優先選用模板濃度低的 PCR 產物進行分析。
4. 根據每1000bp的預期突變數按下表確定30uL易錯PCR體系中MnCl2和dGTP的用量（這是在模板DNA不超過1ng的前提下的數據）。表中的Mn表示易錯PCR的MnCl2, dG表示易錯 PCR的dGTP：
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預期突變數
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2 個
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3 個
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4 個
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5 個
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6 個
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7 個
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8 個
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Mn 用量（uL）
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0
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1.0
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2.5
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4.0
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4.0
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4.0
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4.0
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dG用量（uL）
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0
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0
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0
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1.0
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2.0
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3.0
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4.0
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5. shouci次建議設置 3 個模板濃度。在 3 干凈的 PCR 管中，分別加入下列成分（這里是設置30uL 的反應體系，如果反應體系不是30 uL，則各成分用量需要按等比例增加或減少） ：
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成分
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模板用量1
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模板用量2
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模板用量3
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易錯PCR Mix, 10×
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3 uL
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3 uL
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3 uL
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易錯PCRdNTP, 10×
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3 uL
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3 uL
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3 uL
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易錯PCRMnCl2
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根據上步計算
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根據上步計算
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根據上步計算
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易錯PCRdGTP
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根據上步計算
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根據上步計算
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根據上步計算
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自備 DNA 模板
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1 uL（1ng/uL）
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1 uL（10ng/uL）
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1 uL（100ng/uL）
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自備 PCR引物 (10 uM each)
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1 uL each
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1 uL each
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1 uL each
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易錯PCR Taq DNA 聚合酶
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0.5 uL
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0.5 uL
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0.5 uL
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超純水
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補水到 30uL
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補水到 30uL
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補水到 30uL
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6. 按已經優化的常規 PCR條件進行易錯 PCR：
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PCR前變性
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94℃ 3 分鐘
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易錯PCR(循環 30-60 次)
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94℃ 1 分鐘
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45℃ 1 分鐘
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72℃ 1 分鐘（對1Kb 長的模板）
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注：易錯 PCR 一般不需要熱啟動，也不需要在PCR結束后做延伸處理。長度每增加 1Kb，時間延長1 分鐘。易錯 PCR 循環次數越多，突變DNA（擴增產物）與非突變 DNA（模板）的比例就越高。此外在突變率和模板長度恒定的情況下，擴增次數越多，發生突變的數就越高，在同一模板上發生的突變位點數就越多，所以shouci次實驗時keyi做 30、35、40、45、50、55、60 次7 個循環數的比較。
7. 電泳檢測是否得到預計長度的PCR產物。如果沒有，可以調整模板用量和 PCR 參數。
8. 膠回收易錯 PCR 擴增產物、克隆并對單菌落進行功能篩選或測序分析、如果需要增加突變率，可以以突變后的 DNA 為模板，進行下一輪易錯 PCR。
疑難解答
Q：現象：沒有 PCR產物。
A：可能原因：一是引物沒有優化，可以重新設計引物；二是模板 DNA 太少，可以增加用量；三是模板不純，keyi先膠回收；四是 DNA 溶液中有 EDTA，可以適當補加Mg++。
Q：現象：太多的 PCR 條帶或PCR條帶模糊一片。
A：可能原因：一是模板有膠回收、二是 PCR 循環數太多；三是復性溫度太低；四是引物沒有優化；五是 PCR 條件沒優化，可以使用 touch-down PCR。
Q: 如果需要更高的突變率，如何辦？
A: 可以使用連續多次易錯 PCR 來提高突變率。但先用膠純化回收易錯 PCR片段,再用于下一輪易錯 PCR。此外不能用少于千分之一的shouci次易錯PCR產物作為第二輪易錯PCR的模板，否則多樣性將受到影響。第三輪易錯 PCR keyi使用所有第二輪的易錯 PCR 產物作為模板，但需要在10mL 體系中完成（可以分成很多100uL 體系進行）。
關聯產品：易錯PCR試劑盒（CAT#:101005-100）
以下是天恩澤品牌部分熱銷產品，如需其他品牌產品請咨詢本店客服：
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品牌
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產品貨號
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貨品名稱
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規格
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天恩澤
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200101-50
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第二代病毒采運試劑盒（低敏型）原拭子病毒采運試劑盒，核酸診斷用
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50次/盒
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天恩澤
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200201-50
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第三代免提核酸提取病毒采運試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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200601-50
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熒光及可視化LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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200603-50
|
熒光及可視化RT-LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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200108-2.5L
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xinguan病毒滅活液A型
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2.5L/瓶
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天恩澤
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91103-250
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非凍型拭子病毒保存液
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250ml/瓶
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天恩澤
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15-81920
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SARS-CoV-2冠狀病毒N基因探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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16-81920
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SARS-CoV-2冠狀病毒N基因熒光及可視化RT-LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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15-23000
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African Swine Fever Virus(ASFV)非洲豬瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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16-23000
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African Swine Fever Virus(ASFV)非洲豬瘟病毒LAMP試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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15-29420
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Yersinia pestis鼠疫耶爾森菌(鼠疫桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒
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50次/盒
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天恩澤
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71201-50
|
柱式動物RNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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71001-50
|
柱式病毒RNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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60705-50
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一管式植物DNA提取試劑盒
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50次/套
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天恩澤
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3070-100
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動物RNA提取試劑盒（TRIzol）
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100mL/瓶
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天恩澤
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81027-50
|
TRIzol伴侶
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50次/套
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天恩澤
|
70701-50
|
柱式病毒DNA提取試劑盒
|
50次/套
|
|
天恩澤
|
3674-50
|
一管式病毒DNA提取試劑盒
|
50次/套
|
|
天恩澤
|
90404-50
|
柱式植物RNA提取試劑盒2.0
|
50次/套
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天恩澤
|
60802-50
|
柱式細菌DNA提取試劑盒
|
50次/盒
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天恩澤
|
71203-50
|
柱式植物RNA提取試劑盒
|
50次/套
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|
天恩澤
|
60602-50
|
柱式植物DNA提取試劑盒
|
50次/套
|
|
天恩澤
|
90315-250
|
非凍型尿液DNA保存液
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250mL/瓶
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|
天恩澤
|
3660-250
|
非凍型組織DNA保存液
|
250mL/瓶
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天恩澤
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3060-250
|
非凍型組織RNA保存液
|
250m/瓶
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天恩澤
|
90805-10
|
即用型PCR試劑盒3.0
|
1ml×10/盒
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天恩澤
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90708-1.5
|
即用型高保真PCR試劑盒
|
1.5mL/瓶
|
|
天恩澤
|
90408-1
|
2X 染料法熒光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix）
|
1ml/管
|
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天恩澤
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190303-1
|
2X 探針法qPCR Mix （TaqMan探針法熒光定量PCR試劑盒）
|
1ml/管
|
|
天恩澤
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101005-100
|
即用型易錯PCR試劑盒
|
100次/套
|
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天恩澤
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160903-100
|
可調式易錯PCR試劑盒
|
100次/套
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天恩澤
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3090-250
|
天凈沙RNase清除劑A型（原固相RNase清除劑）
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250mL/瓶
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|
天恩澤
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3091-1.5
|
天凈沙RNase清除劑B型（原液相RNase清除劑）
|
1.5mL/套
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天恩澤
|
140648-250
|
PCR污染清除劑
|
250 mL/瓶
|
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天恩澤
|
70902-1.5
|
PCR級甜菜堿溶液，5M
|
1.5mL/管
|
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天恩澤
|
100805B-250
|
Tris飽和酚-lvfang-yiwuchun混合液（DNA提取用）
|
250ml/瓶
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天恩澤
|
130502-50
|
無內毒素水
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50mL/瓶
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天恩澤
|
160251-250
|
4%中性甲醛固定液
|
250mL/瓶
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天恩澤
|
100302-100
|
包涵體蛋白溶解及復性套裝
|
100次/次
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天恩澤
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200604
|
核酸釋放劑(DNA-RNA通用型)
|
300次/盒
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天恩澤
|
61202-10
|
天凈沙核酸釋放劑
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10mL/瓶
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天恩澤
|
70303-1.5
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綠如藍核酸染料（UV）
|
1.5mL/管
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|
天恩澤
|
70503
|
DNA電泳分子量標準系列
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50次/管
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|
天恩澤
|
小師弟
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高壓快速電泳預制膠
|
10塊/盒
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