DE-32 DE-52纖維素已停產無替代品的詳細介紹目前常用的離子交換纖維素列于下表DE-32 DE-52纖維素 DEAE - 纖維素形狀長度 (微米)交換當量 (毫克當量 / 克)蛋白吸附容量 (毫克 / 克)床體積(毫升 / 克) 胰島素( pH8.5 )牛血清清蛋白( pH8.5 )pH6.0pH7.5 DE-22 DE-23 DE-32 DE-52 CM- 纖維素 CM-22 CM-23 CM-32 CM-52改良纖維性 * 同上(除細粒) 微粒性(干粉) 同上(溶脹) 改良纖維性 同上(除細粒) 微粒性(干粉) 同上(溶脹)12~400 18~400 24~63 24~63 12~400 18~400 24~63 24~631.0 ± 0.1 1.0 ± 0.1 1.0 ± 0.1 1.0 ± 0.1 0.6 ± 0.06 0.6 ± 0.06 1.0 ± 0.1 1.0 ± 0.1750 750 850 850 溶菌酶 (pH5.0) 600 600 1,260 1,260450 450 660 660 7S -γ球蛋白( pH5.0 ) 150 150 400 4007.7 8.3 6.0 6.0 pH5.0 7.7 9.1 6.8 6.87.7 9.1 6.3 6.3 pH7.5 7.7 9.1 6.7 6.7
* :英國 Whatman 廠的型號,原來有舊型號如 DE-1 ,為長纖維性,長度 1000 微米。還有 DE-11 ,纖維性, 50 ~ 250微米,對牛血清清蛋白的吸附容量僅為 130 毫克 / 克。Cellulose DE-52 纖維素 DE-52 二乙氨基乙基纖維素DE52別名 DEAE 纖維素52 ;離子交換纖維素英文名 Cellulose-DEAE,DE 52分子式 離子交換基團-OCH2CH2N(C 2H5)2分子量 為已經過泡脹的二乙氨基乙基纖維素,為中等堿度陰離子交換劑。對高相對分子質量聚合電解質有較好的解析。游離堿型。1kg 中約含有300g干燥品。容量1mmol/g (干)。典型吸收值(胰島素相對分子質量12000)850mg/g 、(牛血清蛋白)660mg/g。 柱色譜用吸附劑,分離提純蛋白質、核酸、低相對分子質量蛋白質、酶、細胞碎片和細胞。 本品應密封保存。 物理形態功能團正常pH范圍小離子電量meg/dg(4)蛋白容積(1)mg/dg蛋白容積mg/ml柱體積每升所需的離子交換劑kg(2)柱床體積填料(3)密度dg/ml DE-52二乙氨乙基2 -9.50.88 -1.08700 (b)1300.90.19 (e)
離子交換層析法是所有生物分子純化技術zui為簡明、普通和方便的方法。因而,Whatman離子交換填料廣泛地用于從實驗室試驗到大規模工業生產。在生物分子純化領域已有三十多年的歷史了。填料適用于柱分離和分批分離。產品用高質量纖維制成。應用:1、人絨促性素(HCG)建立了以pH4.0、0.05mol/L醋酸鹽緩沖液溶解HCG粗品、經人造沸石吸附和DEAE-纖維素(DE-52)柱純化的方法,HCG效價達3000U/mg以上,收率提高10%以上,且生產周期縮短,節約了乙醇用量2、重組蛋白的純化:收集誘導表達后的菌體,溶于50mmol/L的咪唑鹽酸(pH 6.5)溶液,超聲波處理使菌體裂解,12000×g30分鐘離心取上清,加樣于平衡好的DEAE-52纖維素層析柱,使用0~0.3 mol/L NaCl梯度洗脫,收集含重組16000蛋白管,用25mmol/L Tris-醋酸透析后,上樣于平衡好的PEI(NH)柱,1mol/L醋酸鈉洗脫,收集含重組16000蛋白管。3、IgG的簡易快速提取法DEAE-纖維素直接提取法:取樣品直接過DEAE-纖維素柱。下面介紹的是zui為簡單的燒杯法。⑴ 以一定數量的DEAE52放入燒杯中,加入0.01Mol/L pH8.0PB緩沖液,靜置30min,去上清細粒,再重復一次。⑵用布氏漏斗(內放兩層濾紙)過濾。⑶以5g濕重的DEAE-纖維素加1ml血清及3ml蒸餾水混合液的比例,加入各成分,充分攪拌。⑷于4℃中放置1h,中間攪拌數次。⑸用布氏漏斗抽濾,再用0.01Mol/L pH8.0PB緩沖液沖洗纖維素,抽濾。濾液即為提取的IgG液。4、采用DEAE-52 纖維素柱層析法對脫蛋白.和脫色后的烏龍茶多糖進行分離
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