品牌: biolzy
公司: 上海聯(lián)碩生物科技有限公司
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一、酵母培養(yǎng)基種類及用途
一缺培養(yǎng)基/單缺培養(yǎng)基
用于單質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化篩選,外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互補(bǔ)、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)初始質(zhì)粒轉(zhuǎn)化。
二缺培養(yǎng)基/雙缺培養(yǎng)基
用于雙質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化篩選,外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互補(bǔ)、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)初始質(zhì)粒轉(zhuǎn)化免疫共沉淀,Y187和AH109酵母交配實(shí)驗(yàn),接合型二倍體篩選。
三缺培養(yǎng)基
用于雙質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化篩選和報(bào)告基因檢測(cè),外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互補(bǔ)、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)報(bào)告基因檢測(cè)Y187和AH109酵母交配實(shí)驗(yàn)后報(bào)告基因分析(His3,Ade2)。
四缺培養(yǎng)基
用于報(bào)告基因分析,酵母雙雜交系統(tǒng)和酵母三雜交系統(tǒng)報(bào)告基因檢測(cè)、Y187和AH10。
五缺培養(yǎng)基(訂制)
用于報(bào)告基因分析和表型分析,酵母三雜交系統(tǒng)報(bào)告基因檢測(cè)(His3,Ade2)、酵母營養(yǎng)缺陷型分離鑒定和表型分析。
六缺培養(yǎng)基(訂制)
用于報(bào)告基因分析、表型分析和藥物毒理分析,酵母三雜交系統(tǒng)報(bào)告基因檢測(cè)、酵母營養(yǎng)缺陷型分離鑒定和表型分析、藥物毒理分析。
注意事項(xiàng):
1.GAL1啟動(dòng)子誘導(dǎo)表達(dá)要選用MinimalSDAgarBaseGal/Raf培養(yǎng)基。
在配制酵母缺陷培養(yǎng)基時(shí),培養(yǎng)基會(huì)變色,由淺黃到深褐色不等,對(duì)酵母的生長不會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重影響。
3.MinimalSDAgarBaseGal/Raf培養(yǎng)基高溫高壓下可能對(duì)誘導(dǎo)效果產(chǎn)生抑止,尤其是在做表達(dá)調(diào)節(jié)介導(dǎo)的功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)需特別注意!
二、酵母培養(yǎng)基的配制
(1)RichLiquidMedia(Broth)
1.取50克的YPD或者YPDA加1升的去離子水中溶解。
調(diào)節(jié)pH至6.5。121℃高壓滅菌十五分鐘。
3.避光、室溫條件下儲(chǔ)存滅菌培養(yǎng)基。
(2)RichPlatingMediawithAgar
1.取70克的YPDAgar或者YPDAAgar加1升的去離子水中溶解(瓊脂在高壓滅菌后才能溶解)。
2.調(diào)節(jié)pH至6.5.121℃高壓滅菌十五分鐘。
3.冷卻到50℃把培養(yǎng)基倒入平板中,室溫使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。
(3)MinimalLiquidMedia(Broth)
根據(jù)下表在1L去離子水中加入相應(yīng)量的SD培養(yǎng)基和氨基酸混合物,攪拌溶解。
調(diào)節(jié)pH至5.8。121℃高壓滅菌十五分鐘。
3.4℃冰箱避光儲(chǔ)存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基。
(4)MinimalPlatingMediawithAgar
根據(jù)下表,在1L去離子水中加入相應(yīng)量的SD培養(yǎng)基和氨基酸混合物,攪拌溶解(瓊脂在高溫滅菌后溶解)。調(diào)節(jié)pH至5.8。121℃高壓滅菌十五分鐘。
3.冷卻到50℃把培養(yǎng)基倒入平板中,室溫使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。
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