品牌: wanleibio
公司: 沈陽萬類生物科技有限公司
貨號: WLA019b 保存條件: -20℃ 規格: 100T(促銷)
產品詳情請聯系金山科研平臺微信:jinshanbio 產品名稱: 全蛋白提取試劑盒產品概述: 全蛋白提取試劑盒(Whole Cell Lysis Assay)可用于從哺乳動物組織和細胞中提取全蛋白,用含有蛋白酶抑制劑的裂解緩沖液Lysis Buffer勻漿裂解組織或細胞,提取過程簡便高效。獲得的全蛋白可用于Western Blot、IP等后續研究,但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究。保存條件:-20℃保存,本試劑盒自訂購之日起一年內有效。操作流程:Ⅰ細胞蛋白提取1.貼壁細胞 :用預冷的1x PBS洗2-3次, 以洗去培養液。2. 懸浮細胞:將細胞及培養液移至預冷的離心管中,離心10min(1000rpm)后,棄上清。 3. 將預冷的Lysis Buffer按每1ml加入10μl PMSF的比例混勻備用,Lysis Buffer加入量參考下表。
培養板規格細胞數量Lysis Buffer加入量100mm(培養皿)5x10 6個600μl35mm(6孔板)1x10 6個200μl(每孔)
4. 用細胞刮(沉淀振蕩)充分破碎細胞,將其倒入離心管中超聲;如果沒有超聲儀,冰上裂解 30min。5.12000rpm,4℃離心 , 10min,上清為全蛋白提取物,可進行蛋白定量。6. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。Ⅱ組織蛋白的提取1. 取新鮮組織 , 用預冷的1xPBS洗2-3次。2. 將組織剪成小塊 , 放入預冷的研缽中 , 倒入液氮充分研碎。3. 將預冷的Lysis Buffer按每 1ml 加入10μl PMSF的比例混勻備用。4. 每100mg組織應加入0.5-1ml Lysis Buffer,充分研磨。如果粘度過大則再需加入一定量Lysis Buffer 再次研磨,之后進行超聲。5.12000rpm,4℃離心 , 10min,上清為全蛋白提取物,可進行蛋白定量。6. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。詳情請致電咨詢:400-602-0407(轉2號鍵)或登錄公司官網www.wanleibio.cn 溫馨提示:不可用于臨床治療。
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