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品牌: 48563 公司: 武漢巴菲爾生物技術(shù)服務(wù)有限公司

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服務(wù)介紹實(shí)驗(yàn)流程：1.設(shè)計(jì)合成3條shRNA質(zhì)粒2.利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染目的細(xì)胞（3條shRNA質(zhì)粒和一條空載體（NC））3.檢測干擾效率，如Realtime PCR或者Western Blot等4.將篩選出的干擾效率最好的shRNA用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)篩選出的干擾片段可亞克隆到shRNA質(zhì)粒、腺病毒質(zhì)粒、慢病毒質(zhì)粒等載體上，用于后續(xù)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，腺病毒包裝或慢病毒包裝等服務(wù)內(nèi)容1、RNAi是轉(zhuǎn)錄后水平的基因沉默機(jī)制；2、RNAi具有很高的特異性，只降解與之序列相應(yīng)的單個(gè)內(nèi)源基因的mRNA；3、RNAi抑制基因表達(dá)具有很高的效率，表型可以達(dá)到缺失突變體表型的程度，而且相對很少量的dsRNA分子（數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于內(nèi)源mRNA的數(shù)量）就能完全抑制相應(yīng)基因的表達(dá)，是以催化放大的方式進(jìn)行的；4、RNAi抑制基因表達(dá)的效應(yīng)可以穿過細(xì)胞界限，在不同細(xì)胞間長距離傳遞和維持信號甚至傳播至整個(gè)有機(jī)體以及可遺傳等特點(diǎn)；5、dsRNA不得短于21個(gè)堿基，并且長鏈dsRNA也在細(xì)胞內(nèi)被Dicer酶切割為21 bp左右的siRNA，并由siRNA來介導(dǎo)mRNA切割。而且大于30 bp的dsRNA不能在哺乳動物中誘導(dǎo)特異的RNA干擾，而是細(xì)胞非特異性和全面的基因表達(dá)受抑和凋亡；6、ATP依賴性：在去除ATP的樣品中RNA干擾現(xiàn)象降低或消失顯示RNA干擾是一個(gè)ATP依賴的過程。可能是Dicer和RISC的酶切反應(yīng)必須由ATP提供能量。價(jià)格周期咨詢客戶須知客戶提供1、目的基因序列或登錄號2、需轉(zhuǎn)染的細(xì)胞或代購3、目的蛋白一抗（WB驗(yàn)證）服務(wù)承諾終產(chǎn)品1、構(gòu)建好的shRNA質(zhì)粒及其穿刺保存菌；2、電子版的測序結(jié)果及彩圖；3、干擾效率檢測實(shí)驗(yàn)報(bào)告。