品牌: biomics
公司: 百奧邁科生物技術(shù)有限公司
提供商: Biomics Biotech 服務(wù)名稱: miRNA 熒光素酶質(zhì)粒構(gòu)建 規(guī)格: 個(gè)
產(chǎn)品詳情請(qǐng)聯(lián)系金山科研平臺(tái)微信:jinshanbio
miRNA抑制劑(Anti-miRNA)表達(dá)載體根據(jù)客戶需要,將含有一個(gè)或多個(gè)miRNA結(jié)合位點(diǎn)的序列克隆于II型或III型啟動(dòng)子的下游,通過轉(zhuǎn)染的方式將載體導(dǎo)入培養(yǎng)細(xì)胞,轉(zhuǎn)錄出含miRNA結(jié)合位點(diǎn)的RNA序列,可特異、高效地抑制生物體內(nèi)源性miRNA的活性,以進(jìn)行功能缺失性研究,是研究miRNA功能的必要工具。
1服務(wù)流程:a) 提供您所需要構(gòu)建miRNA名稱,miRbase登錄號(hào)或者序列,由我公司專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并給出報(bào)價(jià);b) 簽訂miRNA抑制表達(dá)質(zhì)粒載體構(gòu)建合成合同,支付預(yù)付款;c) 設(shè)計(jì)合成引物, PCR反應(yīng)擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物酶切;d) 將酶切產(chǎn)物純化,克隆至miRNA抑制表達(dá)質(zhì)粒載體系統(tǒng);e) 最后通過DNA測序,確認(rèn)插入片段的準(zhǔn)確性;f) miRNA抑制表達(dá)質(zhì)粒合成結(jié)束,發(fā)貨并向客戶提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
2提供結(jié)果a)質(zhì)粒;b) 測序圖譜/序列;c) miRNA抑制表達(dá)質(zhì)粒載體構(gòu)建報(bào)告書。
miRNA 熒光素酶質(zhì)粒構(gòu)建Biomics構(gòu)建您所要研究的miRNA靶基因3’UTR區(qū)域,您只需將miRNA mimics與構(gòu)建好的靶基因載體共轉(zhuǎn),即可檢測miRNA是否對(duì)靶基因有調(diào)控作用。當(dāng)您需要篩選與疾病相關(guān)的miRNA時(shí),只須將疾病基因的3’UTR報(bào)告載體與miRNA文庫共轉(zhuǎn),即可獲得大量可靠的miRNA調(diào)控信息,高效,準(zhǔn)確。
1服務(wù)流程:
a) 提供您所需要構(gòu)建的基因名,GeneBank登錄號(hào)或者基因3’UTR序列信息,由我公司專業(yè)技術(shù)人員根據(jù)序列具體情況設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案并給出報(bào)價(jià);
b) 簽訂3’UTR質(zhì)粒載體構(gòu)建合同,支付預(yù)付款;
c) 設(shè)計(jì)合成3‘UTR克隆引物,PCR反應(yīng)擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物酶切;
d) 將PCR酶切產(chǎn)物純化,克隆至報(bào)告基因檢測系統(tǒng);
e) 最后通過DNA測序,確認(rèn)插入片段的準(zhǔn)確性,完成實(shí)驗(yàn);
f ) 載體構(gòu)建完成后,發(fā)貨并向客戶提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
2提供結(jié)果
a) 裝載靶基因3’UTR的質(zhì)粒;
b) 測序圖譜/序列;
c) 載體構(gòu)建報(bào)告書。
3備注
客戶需準(zhǔn)備熒光照度計(jì)及雙熒光素酶檢測試劑盒。miRNA靶位點(diǎn)預(yù)測工具
miRNA的研究意義之重大是毋庸置疑的。然而,與新的miRNA的頻頻發(fā)現(xiàn)相比,miRNA的功能研究相對(duì)緩慢。到目前為止,在發(fā)現(xiàn)的4449多個(gè)miRNA中,確定功能的miRNA僅有幾十個(gè)。導(dǎo)致miRNA功能研究進(jìn)展緩慢的非常重要的原因是miRNA的作用靶標(biāo)難以確定。事實(shí)上,通過實(shí)驗(yàn)方法確定miRNA的作用靶標(biāo)非常耗時(shí),目前尚無高通量的靶標(biāo)鑒定方法。因此,通過理論方法預(yù)測miRNA的作用靶標(biāo)成為當(dāng)前識(shí)別miRNA作用靶標(biāo)的較為理想的途徑。以下重點(diǎn)介紹幾種經(jīng)典預(yù)測軟件的算法分析,其他軟件(見下表)請(qǐng)查看相應(yīng)網(wǎng)站。
靶序列預(yù)測工具適用物種鏈接EMBL果蠅http://www.russell.embl-heidelberg.de/miRNAsmiRanda果蠅,脊椎動(dòng)物http://microrna.org/miranda.htmlPicTar脊椎動(dòng)物,果蠅http://pictar.bio.nyu.eduTargetScan脊椎動(dòng)物http://genes.mit.edu/targetscanRNA hybrid果蠅http://www.techfak.uni-bielefeld.de/persons/marc/mirna/targetsViTa病毒http://vita.mbc.nctu.edu.tvmiTargert動(dòng)物images/service/trtrtd width="113">MiRTif動(dòng)物http://mirtif.bii.a-star.edu.sgmiRacle動(dòng)物http://miracle.igib.res.in/miraclemicroTar動(dòng)物http://tiger.dbs.nus.edu.sg/microTarEIMMo人,果蠅,線蟲,斑馬魚http://www.mirz.unibas.ch/ElMMomiRU植物http://bioinfo3.noble.org/miRNA/miRU.htmlDIANA-MicroT人,鼠http://diana.pcbi.upenn.edu/DIANA-microTRNA22動(dòng)物images/service/trtrtd width="113">MicroInspector動(dòng)植物、病毒http://mirna.imbb.forth.gr/microinspectorTarBase實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miRNA靶基因images/service/table 資料下載:
RNAi技術(shù)手冊(cè).pdf 附件下載 (下載 25 次)
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