品牌: biomics
公司: 百奧邁科生物技術有限公司
提供商: Biomics Biotech 服務名稱: CRISPR /Cas9 基因敲除技術
產品詳情請聯系金山科研平臺微信:jinshanbio CRISPR (ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)RNA,是最近幾年才發現的原核生物中的調控RNA,用以抵御病毒和質粒入侵。在II型CRISPR系統中,CRISPR RNA(crRNA)與轉錄激活crRNA(Trans-activating crRNA, tracrRNA)退火形成的復合物能特異識別基因組序列,引導Cas9核酸內切酶在目的片段生成DNA雙鏈斷裂(double-strand breaks, DSBs)。CRISPR-Cas系統的高效基因組編輯功能已被應用于多種生物,包括人、小鼠、大鼠、斑馬魚、秀麗隱桿線蟲、植物及細菌。多個科研小組的研究都顯示,與鋅指核酸酶(ZFNs)和轉錄激活樣效應核酸酶(Transcription activator-like effector nucleases, TALEN)相比較,CRISPR-Cas系統介導的基因組靶向實驗在真核細胞中具有相似甚至更高的效率。
Biomics公司專注于RNA基因調控多年,最新推出基因組編輯工具CRISPR/Cas9專家系統,該系統靈活簡單、可以對特定基因組位點進行切割置換,特異性高、細胞毒性低。CRISPR/Cas9系統可廣泛應用于基因組工程,如基因抑制,基因敲除,基因敲入,基因修復等。CRISPR-Cas9體系的RNA-DNA識別機制為基因組工程研究提供了一項簡便而強大的工具。其最重要的優勢是Cas9蛋白可在多個不同的gRNA的引導下同時靶向多個基因組位點,起到多靶點調控的作用。
CRISPR與RNAi的區別目前已經廣泛應用的RNAi技術的靶標是mRNA,而CRISPR通過RNA識別DNA序列然后再改變DNA序列,是可以遺傳的。由于編碼mRNA的DNA序列只占總DNA的極少部分,因此靶向DNA序列的CRISPR的靶標要比RNAi廣得多,更有可能篩選出針對某DNA序列的特異CRISPR靶標。
作為一種新的基因編輯技術,CRISPR/Cas9有以下特點和優勢:1、操作簡單,靶向精確性更高。sgRNA靶向序列和基因組序列必須完全匹配,Cas9才會對DNA進行剪切。編碼sgRNA的序列不超過100bp,因此比構建TALENs和ZENs更簡單方便,用于CRISPR的sgRNA識別序列僅需20個核苷酸。2、CRISPR/Cas9系統是由RNA調控的對DNA的修飾,其基因修飾可遺傳。3、基因修飾率高,基因調控方式多樣,例如敲除、插入、抑制、激活等4、可實現對靶基因多個位點同時敲除。5、無物種限制。6、實驗周期短,最快僅需2個月,節省大量時間和成本。
? 已合作單位: 北京大學(人)、復旦大學(人)、同濟大學(人)、上海交通大學(人)、首都醫科大學(鴨)、中煙鄭州煙草研究所(煙草)、福建農林大學(草菇、金針菇、大腸桿菌)、溫州醫學院(鼠)、浙江工業大學(枯草芽孢桿菌)、寧夏大學(解淀粉芽孢桿菌)、深圳大學(人)、暨南大學(鼠/人)、中國水產科學研究院(青鳉)、山東大學(人)、東北大學(動物)、內蒙古自治區醫院(人)、弗吉尼亞理工學院(人)、南京農業大學(家蠶/二化螟)、揚州大學(淋病球菌)、中國農業大學(豬)、江蘇省農業科學院(支原體)、南方醫科大學(人)、武漢大學(水稻/人) 上海市兒童醫學中心(人/斑馬魚 激活) 西北農林科技大學(山黧豆)、中國醫學科學院醫學生物學研究所(人)。吉林農業大學(大腸桿菌/維氏菌) 吉林省農業科學院(雙子葉植物) 南開大學(大腸桿菌)、中國農業科學院蘭州獸醫研究所(金倉鼠)、甘肅農業大學(絲狀真菌)、西南大學(人)、 中山大學(單子葉植物)、天津醫科大學(人)、湖南師范大學(人)、福建省農科院(卵菌)、廣西大學動物繁殖研究所(動物、激活)、中科院國家蛋白質科學中心(人、lncRNA)、華南理工大學、東北師范大學(動物)、新鄉醫學院(動物)、中國科學院生態環境研究中心(成團泛菌)……
? 物種包括: 1.人;2.家鼠;3.煙草;4.家兔;5.家蠶;6.金倉鼠;7.青鳉魚;8.芽孢桿菌;9.大腸桿菌;10.食用菌;11.絲狀真菌;12.鴨;13.豬;14. 山黧豆;15.卵菌;16.成團泛菌;17.水稻;18.支原體;19.乙肝/HPV等雙鏈DNA病毒;……
兩篇science 文章證明CRISPR /Cas9系統在哺乳動物細胞有效RNA-Guided Human Genome Engineering via Cas9 Science. 2013 Feb 15 339(6121):823-6.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23287722Multiplex Genome Engineering Using CRISPR/Cas Systems Science. 2013 Feb 15 339(6121):819-23.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23287718BiomicsCRISPR/Cas9相關產品:Precut pSG-target Cloning kit & SSA assayDifferent type cas9 expression plasmidCRISPR /Cas9載體T7 sgRNA MICscriptTM KIT/sgRNA synthesis productPrecut SgRNA Cloning kit & pSD-gRNA PlasmidEzOmicsTM RNA QUICK clear KIT-------一步純化RNA轉錄產物Biomics CRISPR相關服務:sgRNA序列設計sgRNA表達載體構建sgRNA體外合成全基因組sgRNA文庫的構建sgRNA活性檢測Surveyor法及測序驗證穩定表達Cas9蛋白細胞株篩選利用CRISPR系統進行基因重組donor質粒構建植物CRISPRCRISPR/Cas9技術討論群:342716231微信號:Biomics-RNAi
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